科研产出
南方根结线虫食道腺表达基因7E12影响植物的初步研究
《中国农学通报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要:南方根结线虫(Meloidogyne incognita)是一种重要的植物寄生线虫,它的食道腺产生的分泌蛋白是对寄主造成危害的致病因子。鉴定这些编译分泌蛋白的基因特性,是认知南方根结线虫对植物致病性或寄生性机理的关键所在。通过使用烟草根部特异表达基因TobRB7的△0.3缺失的启动子,替换植物过表达载体pBI-121的CMV(烟草花叶病毒)35S启动子,构建了南方根结线虫食道腺细胞表达的基因7E12的植物表达载体pBI-Trp-7E12和pBI-Trp。pBI-Trp在本研究中作为空白对照使用。利用农杆菌侵染花粉管通道法把这2个载体转化了模式植物拟南芥。通过利用卡那霉素抗性培养基对已转化的拟南芥进行筛选,获得了T1代转基因植株。这为研究鉴定该基因的特性奠定了基础,以利于进一步研究南方根结线虫对植物的致病性机理。
关键词: 南方根结线虫 食道腺分泌蛋白基因7E12 烟草根部特异表达基因启动子
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石斛属植物遗传多样性的RSAP分析
《农业科学与技术(英文版) 》 2013
摘要:[目的]用 RSAP标记技术分析中国境内分布的33种野生石斛的遗传多样性及亲缘关系。[方法]建立石斛 RSAP-PCR反应体系,从45对 RSAP引物中筛选出33对多态性引物,对33种野生石斛的基因组 DNA进行 PCR扩增。[结果]这33对引物共扩增出2047条带,其中多态性条带为2044条,多态性比例99.8%,平均每对引物产生61.9条多态性条带。材料间遗传相似系数变化范围为0.081-0.442,说明本实验所测试的材料具有较广的遗传基础。根据 RSAP 标记的结果,采用UPGMA法进行聚类分析,将33种野生石斛分为6类。结果表明剑叶石斛和滇桂石斛之间亲缘关系最近,而华石斛与喇叭唇石斛、细叶石斛之间亲缘关系最远。[结论]石斛具有丰富的遗传多样性,该研究可为石斛属的分类、育种及杂交亲本的选择提供分子水平依据。
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拮抗香蕉枯萎病菌的解淀粉芽孢杆菌LX1菌株的鉴定及其抗菌蛋白基因的克隆
《热带作物学报 》 2013 CSCD
摘要:收集海南不同盐碱地的土样进行拮抗香蕉枯萎病菌的微生物分离,对具有较强抑菌作用的菌株进行形态特征、生理生化和分子鉴定,并克隆其抗菌蛋白基因。结果分离到1株具有较强抑制香蕉枯萎病菌能力的细菌LX1,经鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。抑菌实验发现LX1菌株的发酵上清液中粗蛋白有一定的抑菌作用,经过Sephacryl S-200HR柱层析、DEAE Sepharose Fast Flow离子交换层析分离纯化了其中抑菌作用最强的抗菌蛋白。质谱鉴定结果表明,抗菌蛋白与B.amyloliquefaciens FZB42内切葡聚糖酶同源性最高。根据质谱结果克隆了该抗菌蛋白的编码基因,该基因的核苷酸和氨基酸序列与B.amyloliquefaciens FZB42的内切葡聚糖酶的核苷酸和氨基酸序列同源性分别达99%和100%。拮抗香蕉枯萎病菌的芽孢杆菌LX1可作为潜在的防治香蕉枯萎病的的生防制剂,其抗菌蛋白基因也可通过遗传工程应用于香蕉枯萎病的防治。
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辣椒环斑病毒提纯及抗血清制备
《热带作物学报 》 2013 CSCD
摘要:为获得高效、灵敏的辣椒环斑病毒(Chilli ringspot virus,ChiRSV)多克隆抗体,通过差速离心、密度梯度离心等方法首次对辣椒环斑病毒进行了分离纯化,并将获得的高纯度病毒粒子用于免疫新西兰大白兔,制备了该病毒的多克隆抗血清。获得的抗血清经间接法酶联免疫吸附测定(ID-ELISA),效价高达1∶125 000,且特异性高,与黄灯笼辣椒中另一种亲缘关系很近的同属病毒辣椒脉斑驳病毒(Chilli veinal mottle virus,ChiVMV)不发生血清交叉反应、可有效鉴别这2种Potyvirus病毒。获得的抗血清可用于ChiRSV的检测及后续实验,最适工作浓度在1∶5 000~1∶25 000之间。
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海南蔗区甘蔗黑穗病菌生理小种鉴定
《热带作物学报 》 2013 CSCD
摘要:采集海南蔗区8个县市24个乡镇的甘蔗黑穗病菌样品24份,通过甘蔗黑穗病菌鉴别寄主NCO376(免疫)、NCO310(抗小种2,感小种1)、F134(感小种2,抗小种1)、F173(高感)及主栽品种ROC22,确定海南蔗区甘蔗黑穗病菌的生理小种。接种甘蔗黑穗病菌后1 a新植,2 a宿根的发病情况表明:海南蔗区甘蔗黑穗病菌生理小种为小种2,或优势小种为小种2。这对了解海南蔗区甘蔗黑穗病菌生理小种的分化及分布情况,以及对今后海南蔗区甘蔗黑穗病的防控及抗黑穗病甘蔗种质的选育提供依据。
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巴西香蕉叶面积与叶片形态特征关系的定量分析
《热带作物学报 》 2013 CSCD
摘要:采用"3414"设计方案进行田间实验,在实验观测的基础上,建立了中肥不同生育期巴西香蕉叶面积与叶长、叶宽及长宽乘积之间的定量关系,结果表明:不同生育期,巴西香蕉叶面积与叶长、叶宽及长宽乘积最佳模型Y=ax+b,具体关系如下:在营养生长期中,叶面积与叶长、叶宽及长宽乘积间定量关系分别为:A=-2 162+54.957 L、A=-2 202.687+123.919 W、A=-76.014+0.767 P;孕蕾期及抽蕾期,叶面积与叶长、叶宽及长宽乘积间定量关系分别为:A=-6 969+90.584 L、A=-6 971+231.195 W、A=-38.177+0.778 P。经2012~2013年独立资料检验:营养生长期高、低肥叶面积的模拟值与观测值的差值标准误分别为298.098、356.456和232.127 cm2/株,孕蕾期及抽蕾期高、低肥叶面积的模拟值与观测值的差值标准误分别为1 134.310、3 584.610和1 306.924 cm2/株,检验结果表明:所建的香蕉叶面积模型可靠性均较好,具有一定的解释性和通用性,对香蕉理想株型设计、结构与功能关系研究及香蕉生长系统的可视化和数字化均有一定的参考价值。
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菠萝冠芽变异及鸡冠状冠芽遗传稳定性初步研究
《热带作物学报 》 2013 CSCD
摘要:考察了无刺卡因、巴厘和珍珠3个菠萝品种吸芽苗冠芽的变异情况,结果显示:无刺卡因冠芽全为单冠芽,巴厘和珍珠则存在冠芽变异,其中珍珠发生冠芽变异显著高于无刺卡因和巴厘,主要是因为珍珠的复冠率显著高于无刺卡因和巴厘,但3个品种鸡冠状冠芽发生率的差异未达到显著。利用从巴厘和珍珠中发现的3株鸡冠状冠芽及其母株再次繁育成苗,所有鸡冠状冠芽苗成熟时均未再现鸡冠状冠芽表型,表明鸡冠状冠芽不能稳定遗传,受环境影响。然而珍珠鸡冠状冠芽母株的吸芽苗却又再现复冠和鸡冠状冠芽,再次表明品种珍珠的吸芽易于产生冠芽变异。
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农业科研单位休闲农业资源开发研究——以南亚热带作物研究所为例
《中国热带农业 》 2013
摘要:休闲农业是近年来蓬勃发展的新兴产业,部分农业科研单位也开始利用自身的资源优势纷纷发展休闲农业。本文以中国热带农业科学院南亚热带作物研究所为例,深入分析南亚所现有的资源优势与目前发展休闲农业的现状,提出了适合南亚所今后发展休闲农业的模式,以及发展休闲农业应采取的措施与保障。
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橡胶树枯草芽孢杆菌Czk1抑菌活性物质的理化性质
《热带生物学报 》 2013
摘要:采用杯碟法和生长速率法,对橡胶树枯草芽孢杆菌菌株Czk1发酵液中活性物质进行了初步定位.结果表明:活性物质属于胞外分泌型代谢产物,存在于发酵上清液中.理化性质的研究表明,其抗菌物质表现出耐高温,不耐强酸碱,对紫外线和蛋白酶K不敏感,以及对5种常见的金属离子溶液、有机溶剂具有不敏感的特性;采用酸沉淀后甲醇抽提的方法可提取该活性物质.Czk1培养条件的单因子实验结果表明,YPD培养基作为该菌株的发酵液培养基,初始pH值为7.0,以7%接种量接种,摇床培养(28℃,180 r·min-1)3d,Czk1表现出对病原菌最佳的拮抗活性.
关键词: 枯草芽孢杆菌 Czk1 活性物质 生物学性质 橡胶树
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