科研产出
耐盐转基因大豆事件FA8015旁侧序列分离及定性PCR检测
《大豆科学 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：本研究前期利用转基因技术,将菠菜(Atriplex hortensis)甜菜碱醛脱氢酶编码基因Ah BADH导入栽培大豆Williams 82中,获得耐盐性较强的转基因大豆事件FA8015。为进一步加快该转基因事件生物安全评价,本研究分离了FA8015外源T-DNA旁侧序列,并依据其序列特征,建立事件特异性检测方法。Southern杂交结果表明,转基因事件FA8015外源T-DNA为单拷贝插入。利用基因组重测序技术,获得转基因大豆事件FA8015的基因组信息,并与参考基因组Williams 82做比较,初步确定转基因大豆事件FA8015外源T-DNA片段整合位点。然后根据整合位点,设计融合大豆基因组和T-DNA序列的引物,获得了1 160 bp的左边界旁侧序列,包括405 bp的大豆基因组序列和750 bp的T-DNA序列;右边界获得了1 254 bp的旁侧序列,其中601 bp为T-DNA片段,653 bp为大豆基因组序列;序列分析证明转基因事件FA8015的T-DNA整合位点为Chr15染色体的25129882位点,整合方式为正向单拷贝插入,与Southern杂交和重测序结果一致。依据PCR结果设计事件特异性引物,建立了转基因大豆事件FA8015转化体特异性检测方法。该方法特异性强、灵敏度高,可快速识别该转基因大豆事件的身份,为该转化事件及其衍生品的安全性和监管提供技术支撑。
关键词： 大豆 耐盐 转基因事件 重测序 旁侧序列 定性PCR检测 耐盐
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防治玉米丝黑穗病药剂的筛选
《东北农业科学 》 2018 北大核心
摘要：本试验选择6种杀菌剂单剂,配制成种衣剂包衣,进行玉米丝黑穗病防治药剂筛选试验,结果表明:10%灭菌唑对玉米出苗和生长无不良影响,在药种比1∶50包衣浓度下对玉米丝黑穗病的防治效果最好,可达90.92%,可作为防治玉米丝黑穗病的种衣剂活性成分。
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基于DEA-SBM模型的主要玉米品种生产效率研究——以吉林省为例
《数理统计与管理 》 2018 北大核心 CSSCI
摘要：玉米生产效率既反映玉米种植的综合生产能力,又反映了不同玉米品牌耕种过程中的资源配置及利用情况,是衡量和改进玉米生产模式的重要依据之一。本文以吉林省为例,选取种子生产物质成本、劳动投入方面相关内容作为投入指标,选取种子生产公顷产量、产值作为产出指标,运用DEA-SBM模型,根据实地调研数据对2014-2016年吉林省市场份额前21位的玉米品种生产效率进行了实证研究。结果表明,良玉99、天农九、迪卡516、先玉335、金庆707及平安169投入产出效率相对有效。以2016年为例,对非有效玉米品种进行冗余分析,提出了这些品种的效率改进方案,拟为政府和农业生产提供决策参考依据。
关键词： 玉米品种 生产效率 数据包络分析SBM模型 冗余分析
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矮壮素基质浇灌法对番茄幼苗生长及理化指标的影响
《东北农业科学 》 2018 北大核心
摘要：试验以番茄为研究材料,研究育苗前基质浇灌矮壮素(0 mg/L、100 mg/L、200 mg/L、300 mg/L、400 mg/L、500 mg/L)对番茄幼苗生长发育的影响。研究结果表明:施用矮壮素浓度越高,矮化作用越强。试验中,浇灌矮壮素浓度为200 mg/L时,可有效控制番茄秧苗株高、下胚轴长度,并且秧苗的壮苗指数、根冠比、叶绿素含量、过氧化物酶活性等均达到壮苗标准,秧苗表现良好。因此推荐播种前对育苗基质进行底液浇灌矮壮素200 mg/L,可有效控制秧苗徒长,达到壮苗效果。
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紫花苜蓿细胞质雄性不育系及其保持系花蕾的生理生化特性
《中国草地学报 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：为研究紫花苜蓿细胞质雄性不育系的生理生化机制,以不育系及其同型保持系为原料,对不同发育时期花蕾中可溶性糖、淀粉、可溶性蛋白、游离脯氨酸、丙二醛含量及抗氧化酶(过氧化氢酶、过氧化物酶和超氧化物歧化酶)活性进行了测定。结果表明,随着花蕾的生长发育和花粉的发育成熟,不育系MS-GN1A花蕾发育各个时期的可溶性糖、淀粉、可溶性蛋白和游离脯氨酸含量均表现出亏缺现象,而作为膜质过氧化指标的丙二醛和抗氧化酶活性则高于其同型保持系MS-GN1B。
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过表达酵母PAC1增强转基因大豆对大豆花叶病毒的抗性
《中国农业科学 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：【目的】大豆花叶病毒(Soybean mosaic virus,SMV)病是中国大豆产区最主要的病害之一,严重影响大豆产量和籽粒品质。核糖核酸酶PAC1能够识别和降解植物RNA病毒或类病毒复制过程中产生的ds RNAs,从而有效抑制病毒在寄主中的复制与积累。PAC1的这一特点为广谱抗RNA病毒及类病毒转基因作物的创制和培育提供了有效的靶标基因。本研究利用转基因技术,将来源于粟酒裂殖酵母菌(Schizosaccharomyces pombe)的PAC1导入栽培大豆,研究过表达PAC1对大豆SMV抗性的影响,为抗SMV转基因大豆新品种选育提供依据。【方法】采用酶切连接技术,将PAC1连接到双元表达载体p CAMBIA3300中,构建植物表达载体p CAMBIA3300-PAC1。目的基因启动子为组成型强启动子Ca MV 35S,终止子为NOS,筛选标记为草铵膦抗性基因BAR。采用农杆菌介导转化法,将PAC1导入栽培大豆品种Williams82。在利用PAT/BAR试纸、PCR及除草剂(500 mg·L-1 Basta)喷施检测基础上,通过Southern杂交技术进一步分析外源基因在转基因大豆中的整合情况和拷贝数。采用人工摩擦接种法,对T2和T3代转基因大豆株系进行田间抗SMV鉴定农艺性状调查,分析转基因大豆对SMV抗性及遗传稳定性。并利用q RT-PCR技术分析接种SMV 28 d后转基因大豆中SMV积累水平。【结果】共转化2 600多个外植体,获得耐草铵膦(5 mg·L-1)大豆再生植株76株。PCR检测结果表明,其中65株能够扩增出目的条带,大豆遗传转化效率为2.48%。对T1—T3代转基因大豆株系喷施除草剂表明,在500 mg·L-1 Basta处理7 d后,转基因植株表型没有明显变化,而对照(非转基因大豆)植株叶片则黄化枯死。Southern杂交结果表明,外源基因以低拷贝的方式(1—2个)整合至大豆基因组中。摩擦接种SMV SC-3鉴定表明,在接种35 d后,对照出现严重花叶、皱缩等典型SMV发病症状,而转基因大豆仅部分叶片表现出轻微的花叶症状,其病情指数降低至11.11—22.22,较对照(病情指数36.81—46.24)显著降低,且SMV抗性在转基因大豆不同代际间能够稳定遗传。q RT-PCR分析表明,在接种SMV SC-3株系28 d后,转基因大豆中SMV CP表达水平较对照极显著下降。农艺性状调查表明,在未接种SMV条件下,转基因大豆在叶形、花色、种皮色、种脐色、株高、节数、结荚高度、生育期及百粒重等方面与对照没有显著差异。【结论】PAC1过表达显著抑制了SMV的积累及症状发展,增强了转基因大豆对SMV的抗性水平。
关键词： 大豆 大豆花叶病毒 PAC1 农杆菌介导转化 抗性
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绵羊饲料利用率与血清激素相关性及相关基因研究
《东北农业科学 》 2018 北大核心
摘要：本试验通过研究绵羊饲料利用率与几种血清激素浓度间的相关性及相关基因在组织中的表达量,试图探索饲料利用率的影响因素和分子机制。试验选用来自体重相近的15只杜泊羊♂×小尾寒羊♀F_1代公羊,通过饲养试验获得饲料利用率极端差异的两组,分别对血清激素指标和相关基因表达进行测定,开展差异显著性分析和相关性分析,结果显示:两组间试验羊饲料利用率和平均日增重差异显著(P<0.01);饲料利用率高组神经肽Y(NPY)激素浓度显著低于饲料利用率低组(P<0.05),血清中NPY与采食量和饲料利用率呈现低度正相关(r=0.307,P<0.05;r=0.447,P<0.05),与平均日增重呈现中度负相关(r=-0.620,P<0.05),其余激素浓度与饲料利用率相关性状间无显著相关性(P>0.05)且两组间浓度差异不显著(P>0.05);NPY基因在饲料利用率高组的表达水平高于饲料利用率低组,与其在血清中的浓度测定结果相一致;NPY基因在瘤胃中表达量最多,在肌肉中最少。本结果表明:NPY可能是影响饲料利用率的因素之一,对于内在调控机制还需要进一步研究。
关键词： 饲料利用率 血清激素浓度 杜泊羊♂×小尾寒羊♀F1代公羊 神经肽Y(NPY)
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短梗五加果多酚预防大鼠动脉粥样硬化作用
《食品科学 》 2018 EI 北大核心 CSCD
摘要：目的:研究短梗五加果多酚(Acanthopanax sessiliflorus fruit polyphenols,ASFP)对大鼠动脉粥样硬化(atherosclerosis,As)的预防作用,并探讨其作用机制。方法:40只雄性SD大鼠随机平均分成4组,每组10只。采用高脂饮食结合腹腔注射VD3的方法建立As模型,不同剂量ASFP给药组自造模开始之日起分别灌胃150、75 mg/(kg·d)的ASFP,空白组和高脂饮食组大鼠灌胃等量生理盐水,各实验组连续处理12周后,检测大鼠血清生理生化水平并计算As指数;苏木素-伊红染色观察大鼠主动脉As病变情况;Western blot检测主动脉中黏附分子和丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号通路关键基因的蛋白表达水平。结果:与高脂饮食组相比,ASFP能显著降低大鼠血清中的血脂、黏附分子和炎症因子水平,减少主动脉中的脂质沉积,改善各层结构排列紊乱,显著降低主动脉中细胞间黏附分子-1、血管细胞黏附分子-1、磷酸化p38和磷酸化细胞外信号调节蛋白激酶1/2(phospho-extracellular signal regulated kinases 1/2,p-ERK1/2)的蛋白表达量。结论:ASFP具有预防As的作用,其作用可能与其降血脂和抑制p38 MAPK和ERK1/2 MAPK信号通路,进而抑制炎症因子的表达有关。
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春玉米连作体系高产栽培模式优化研究
《植物营养与肥料学报 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：【目的】通过探讨春玉米土壤物理性状、根系动态变化、产量等对不同农学管理模式的响应,为优化玉米高产高效栽培技术提供理论依据。【方法】以先玉335为供试品种,进行了三年大田定位试验,对种植密度、肥料施用、土壤耕作三项关键技术进行优化组合。设计了4种模式:1)按照当地农户习惯,种植密度5.0万株/hm~2,一次性施用化肥N 225、P_2O_5 82.5、K_2O 67.5 kg/hm2,灭茬旋耕(CK);2)种植增密至6.0万株/hm~2,化肥用量为N 190、P_2O_5 75、K_2O 82.5 kg/hm~2,氮肥分两次施用,播前和拔节期分别施78和117kg/hm2,基施有机肥15000 kg/hm2及中微肥60 kg/hm2,灭茬旋耕(Opt-1);3)种植密度7.0万株/hm~2,施化肥量为N 300、P_2O_5 120、K_2O 120 kg/hm~2,氮肥分三次施用,播前、拔节和抽雄期分别施用120、120、60 kg/hm2,磷肥和钾肥分两次施用,播前和拔节分别施用96和24 kg/hm2,基施有机肥15000 kg/hm~2及中微肥150 kg/hm~2,拔节期深松(Opt-2);4)施化肥N225、P_2O_5 90、K_2O 90 kg/hm~2,氮肥分三次施用,播前、拔节和抽雄期分别施用90、90、45 kg/hm~2,磷肥和钾肥分两次施用,播前和拔节分别施用72和18 kg/hm~2,有机肥、中微肥和种植密度同Opt-2(Opt-3)。调查了产量构成、氮素吸收、0—60 cm土壤物理性状和根系动态变化。【结果】产量主要是依靠收获穗数的增加来实现,Opt-1、Opt-2、Opt-3处理下的产量分别较CK高12.1%、15.3%和13.9%。与Opt-3处理相比,Opt-2处理氮肥用量增加33.3%,吸氮量仅增加6.9%,且多集中于茎叶,产量未增加。Opt-2、Opt-3处理在拔节期深松后,吐丝期和乳熟期固相比例有所下降,尤以乳熟期较为显著,平均各土层分别降低了8.8%和7.4%,进而增加了0—40 cm耕层土壤的通透性。Opt-1、Opt-2、Opt-3处理在0—10 cm土层根长、根重和根表面积均显著高于CK,在30—40 cm土层Opt-2、Opt-3处理的根长和根表面积比CK分别增加36.6%、44.6%和34.9%、37.1%;与CK相比,Opt-1、Opt-2、Opt-3处理在玉米吐丝期0—60 cm土壤硝态氮残留量分别减少45.7%、31.0%、23.2%,且处理间差异显著。Opt-2和Opt-3处理在12展叶期进行深松追肥后促进了硝态氮的下移。【结论】通过增密、调肥、深松三项技术措施的集成优化,提高了0—40 cm耕层土壤的通气性,促进了玉米根系下扎且充分生长,吸收利用了0—60 cm土层中的硝态氮,进而显著增加了产量和肥料利用率。通过调整施肥量,补充有机肥和中微量元素,氮磷钾肥分两次施用并结合拔节期深松,其产量和吸氮量较目前广泛使用的栽培模式增幅分别为13.9%和9.5%,是较优的栽培技术模式。
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不同施氮量对玉米花生间作下茬小麦干物质积累及产量构成的影响
《华北农学报 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：为明确适宜玉米花生间作下茬小麦稳产高效的氮肥运筹,在玉米花生间作前茬条件下,以冬小麦品种济麦22为研究材料,以传统施氮量(225. 0 kg/hm~2)为对照,分别设置不同增氮、减氮处理,系统研究了不同施氮量对玉米花生间作下茬小麦产量及产量结构、干物质积累分配及氮肥吸收利用效率的影响。结果表明,两增氮处理及减氮10%处理干物质积累总量、氮素积累总量、花前干物质转运量、花后干物质积累量及其籽粒产量与对照均无显著差异;减氮30%处理显著降低了间作茬小麦拔节后干物质积累总量、氮素积累总量、花后干物质积累量及籽粒产量;以传统施氮量为对照,增加或减少30%范围内,公顷穗数随氮肥减少而降低,且减氮10%处理的公顷穗数与对照无显著差异,均显著高于减氮20%以上处理,但施氮量的增减对穗粒数和千粒质量无显著影响;各减氮处理显著提高了玉米花生间作下茬小麦氮肥偏生产力。综上,该研究条件下,施氮量从225. 0 kg/hm~2减至202. 5 kg/hm~2对玉米花生间作下茬小麦干物质积累及产量形成无显著影响,但显著提高了其氮肥偏生产力。初步得出,该试验条件下,施氮量从225. 0 kg/hm~2减至202. 5 kg/hm~2更利于玉米花生间作下茬小麦的高效安全生产。
关键词： 施氮量 玉米花生间作下茬 干物质积累 产量构成 氮肥利用
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