科研产出
蜻蜓凤梨AfACO2基因的克隆及乙烯响应特性分析
《分子植物育种 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：以热带观赏花卉蜻蜓凤梨(Aechemia fasciata)为材料,在分析转录组数据的基础上,通过cDNA末端快速扩增(rapid amplification of c DNA ends, RACE)技术分离得到乙烯生物合成过程中限速酶1-氨基环丙烷-1-羧酸(1-aminocyclopropane-1 carboxylate, ACC)氧化酶(ACC oxidase, ACO)的一个编码基因,并将其命名为AfACO2。AfACO2基因c DNA全长1 615 bp,开放阅读框(open reading frame, ORF)长954 bp,编码的蛋白含317个氨基酸残基。理化性质分析表明,该蛋白分子质量为35.99 kD,等电点为5.13。Af ACO2有保守的抗坏血酸和辅因子亚铁离子结合位点;系统进化分析、同源性比对及基序分析结果表明该蛋白与拟南芥的At ACO2和AtACO4可能具有相似的功能。实时荧光定量PCR (quantitative real time PCR, qRT-PCR)结果表明,AfACO2转录本在心叶和茎中显著高表达,尤其是在抽薹39 d后的成株心叶中表达量最高。此外,AfACO2转录本的表达量受外源乙烯强诱导。研究结果初步证实Af ACO2是蜻蜓凤梨内源乙烯合成的关键酶,为进一步研究Af ACO2功能、通过基因工程手段调控蜻蜓凤梨开花提供了理论依据。
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Quinadoline C——海南海桑内生真菌的一种新生物碱
《深圳大学学报(理工版) 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：红树植物内生真菌是寻找结构新颖天然产物新药的重要来源.采用正相、反相硅胶柱色谱和Sephadex LH20凝胶柱色谱法,从海南特有红树植物海南海桑内生曲霉菌菌株Aspergillus sp.HS02的麦芽培养基发酵液乙酸乙酯提取物中,分离得到了化合物1,该化合物为发酵液主要成分.利用高分辨电喷雾质谱、一维核磁共振波谱、异核单量子相关谱、异核多键相关谱和氢-氢质子同核相关谱对化合物1结构进行了鉴定,确定为一个新的吲哚生物碱,命名为quinadoline C.利用滤纸片琼脂扩散法评价了该化合物抗农业病原真菌活性.
关键词： 红树植物 海南海桑 内生真菌 曲霉菌 天然产物 新吲哚生物碱
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超高效液相色谱-串联质谱法测定莲雾中51种农药残留量
《理化检验(化学分册) 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：莲雾样品用含1%(体积分数)乙酸的乙腈提取后,经多壁碳纳米管滤过型净化柱净化,采用超高效液相色谱-串联质谱法测定其中51种农药的残留量。质谱分析中采用电喷雾离子源和多反应监测模式。结果表明:51种农药的质量浓度在0.005～0.2mg·L-1内与其峰面积呈线性关系,检出限(3S/N)为0.06～1.50μg·kg-1。按标准加入法进行回收试验,回收率为60.4%～120%,测定值的相对标准偏差(n=6)为2.0%～16%。
关键词： 超高效液相色谱-串联质谱法 多壁碳纳米管滤过型净化 莲雾 农药残留
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椰子木蛾在5个椰子品种上种群生命表参数比较
《热带作物学报 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：椰子木蛾是危害棕榈科植物的重要食叶类害虫。为了明确5个椰子品种对椰子木蛾生长发育和种群参数的影响,应用Jackknife技术统计分析数据。结果表明,椰子木蛾在5个椰子品种上的发育历期存在极显著差异,在文椰3号上完成1个完整世代所需时间最短,为(50.52±0.72)d,在马哇椰子上最长,为(64.97±1.33)d;取食海南本地高种叶片的椰子木蛾雌雄虫蛹重最轻,分别为(47.11±2.16)mg、(25.18±1.13)mg;在文椰3号上椰子木蛾的内禀增长率(rm)和周限增长率(λ)最高,分别为0.1061±4E-04和1.1119±5E-04。综合比较5个椰子品种,文椰3号是椰子木蛾的最适宜取食椰子品种,其次分别为海南本地高种、文椰4号、文椰2号和马哇。
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木薯MeTPP1基因克隆、结构变异及其表达分析
《生物技术通报 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：旨在研究木薯MeTPP1基因在干旱、低温等非生物胁迫响应中的作用。用同源基因克隆的方法从木薯叶片中克隆MeTPP1基因,用MEGA软件构建Neighbor-joining系统进化树,用Dna SP软件分析基因结构变异,用实时荧光定量PCR技术分析MeTPP1基因在不同胁迫处理下的表达特性。结果表明,MeTPP1基因含有一个1 131 bp的开放阅读框,编码376个氨基酸,含有TPP家族保守结构域。系统进化树分析表明,MeTPP1与杨树和杞柳中同源基因的亲缘关系较近,序列相似性分别为77.8%和74.5%。基因结构变异发现,MeTPP1在木薯野生种和栽培种之间共有9个错义突变,它们可能与MeTPP1的表达有关。实时荧光定量PCR分析表明,MeTPP1表达量受到干旱、低温和ABA处理的响应。上述结果表明,MeTPP1在转录水平参与ABA介导的木薯干旱和低温胁迫,可作为候选基因进一步研究其在木薯抗逆中的功能。
关键词： 海藻糖-6-磷酸酯酶 MeTPP1 干旱 低温 表达分析
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一种国外野生沉香的生物活性和化学成分研究
《热带作物学报 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：研究一种国外野生沉香乙醚提取物的生物活性并分析其化学成分,为国外野生沉香的进一步研究和开发利用提供一定的基础。采用乙醚浸提法提取沉香,对提取物分别用MTT法、Ellman法、pNPG法和贝曼漏斗法进行细胞毒、乙酰胆碱酯酶抑制、α-葡萄糖苷酶抑制和杀全齿复活线虫活性测试,利用GC-MS分析提取物化学成分。结果表明,该提取物对5株人体肿瘤细胞、乙酰胆碱酯酶、α-葡萄糖苷酶和全齿复活线虫均表现出一定的生物活性。GC-MS检测鉴定了其中的26个化合物,相对含量为57.39%,包括23个倍半萜类成分,相对含量为56.72%,1个2-(2-苯乙基)色酮类成分,相对含量为0.35%。本次对此种国外野生沉香的生物活性和化学成分研究,发现沉香乙醚提取物具有杀线虫的活性,为更好地开发沉香的药用价值提供了一定的科学依据。
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木薯MeTCP4转录因子的克隆、表达分析及植物表达载体的构建
《分子植物育种 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：TCP转录因子家族基因参与植物生长及环境胁迫的多重调节,然而该家族基因在木薯中少有研究。木薯TCP家族基因有36个,系统进化树分析MeTCP4家族可分为8个亚组。MeTCP4基因是木薯TCP家族36个基因之一,可被miR319转录后剪切。MeTCP4基因开放性阅读框(ORF)长1 269 bp,编码422个氨基酸,预测编码蛋白质相对分子质量为45.75 kD,理论等电点为6.17。从木薯基因组中成功克隆得到MeTCP4基因全长cDNA,荧光定量RT-PCR结果显示MeTCP4基因在各组织器官都有表达,根部表达最低、茎次之、叶子中表达最高并且MeTCP4基因受干旱及低温胁迫抑制。构建高、低植物表达载体,为进一步研究该基因的功能提供依据。
关键词： 木薯 基因克隆 MeTCP转录因子 实时荧光定量PCR 表达载体构建
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猕猴桃属33份种质资源的AFLP遗传多样性分析
《生物学杂志 》 2018 CSCD
摘要：运用扩增片段长度多态性(AFLP)技术,分析了采自于湖南、四川、贵州和海南的33份猕猴桃种质资源的遗传多样性和遗传差异。结果显示,23对AFLP引物共扩增出683条条带,其中多态性条带622条,多态性比例为91.07%,对33份种质材料的区分率达100%。对扩增结果的UPGMA聚类谱系图分析显示,33份种质资源之间的相似系数在0.51~0.95之间,遗传差异性显著。在相似系数0.70的水平上可以将33份种质分为3个类群,Ⅰ类为中华猕猴桃和美味猕猴桃,Ⅱ类为阔叶猕猴桃,Ⅲ类为对萼猕猴桃。在最大的I类类群中,31个中华猕猴桃和美味猕猴桃种质又可以在相似系数0.82水平上分为几个细类,它们具有按地理来源优先聚类的趋势和种内种间的聚类交叉现象。AFLP技术结合传统的形态分类方法可以作为猕猴桃种质分类及选育种的评价依据。
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马铃薯(Solanum tuberosum)潜在内源性致敏蛋白的生物信息学筛选与分析
《分子植物育种 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：当接触特定食物时所复发产生的一种特定的、不利于健康的免疫效应称为食物过敏。马铃薯作为世界第四大粮食作物而被广泛食用,随着基因组学的发展以及马铃薯过敏原信息的逐渐积累,它的致敏性引起高度关注。为探究马铃薯致敏性发病机理,本研究将马铃薯全蛋白基因组与致敏数据库收录的致敏序列进行比对,然后对所筛选出来的致敏蛋白进行保守结构域、生物学功能、系统发育以及染色体定位分析,结果显示:筛选出167条潜在内源性致敏蛋白中发现有11条马铃薯致敏原被数据库收录;分析它们的保守结构域发现,72个蛋白家族主要分布在Chloroa_b-bind、Hsp70和Tryp_alpha_amyl等家族中;通过GO注释对预测马铃薯致敏蛋白进行生物学功能描述;对Hsp70和Tryp_alpha_amyl家族蛋白进行系统发育分析表明马铃薯在遗传进化上具有多样性;预测致敏蛋白多以成簇分布在马铃薯染色体上。本研究为马铃薯蛋白致敏以及后基因组学提供了参考依据。
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2个14-3-3蛋白基因在香蕉果实成熟过程中的表达分析
《热带作物学报 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：通过简并引物和降落PCR方法结合RACE(rapid amplification of c DNA end)技术在香蕉果实c DNA文库中获得2个14-3-3基因,分别命名为Ma14-3-3d和Ma14-3-3h,把Ma14-3-3d和Ma14-3-3h与Ma14-3-3a、Ma14-3-3c、Ma14-3-3e、Ma14-3-3i进行多重序列比对和同源性比较。结果表明:Ma14-3-3d和Ma14-3-3h与Ma14-3-3a、Ma14-3-3c、Ma14-3-3e、Ma14-3-3i具有较高的同源性,同时具有一定的差异性。遗传进化分析结果表明,Ma14-3-3d与Ma14-3-3a、Ma14-3-3c、Ma14-3-3e、Ma14-3-3i同属于non-ε类14-3-3基因,Ma14-3-3h属于ε类14-3-3基因。RT-PCR分析结果表明,Ma14-3-3d和Ma14-3-3h在香蕉不同器官中差异表达,Ma14-3-3d在香蕉的根、茎、叶、花和果中均有表达,且在茎、叶和花中的表达量高于根和果;Ma14-3-3h在根、花和果中的表达量较高,而在茎和叶中的表达量较低。q RT-PCR分析结果表明,Ma14-3-3d基因的表达明显受乙烯的诱导,而Ma14-3-3h在正常成熟、乙烯处理与1-MCP处理的果实中表达量均很低,与果实成熟的相关性不明显。推测Ma14-3-3d可能与香蕉果实成熟密切相关,可能参与乙烯调控果实成熟过程中的生物合成与信号转导。
关键词： 香蕉 Ma14-3-3d Ma14-3-3h 成熟 表达分析
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