科研产出
响应面分析法优化香菇中γ-谷氨酰转肽酶的超声辅助提取条件
《食品科学 》 2010 北大核心 CSCD
摘要：采用响应面分析法对香菇中γ-谷氨酰转肽酶的超声提取工艺进行优化。在单因素试验基础上,根据中心组合(Box-Benhnken)试验设计原理,采用三因素三水平的响应面分析法,以γ-谷氨酰转肽酶的提取率为响应值进行回归分析。结果表明超声辅助提取GGT的最佳条件为提取功率、提取时间、料液比的最佳条件分别为204.84W、28.19min、1:52.29。在上述提取条件下,提取液中GGT的提取率达到11.19U/g,与模型预测值基本相符。
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番茄抗黄化曲叶病毒病基因的AFLP分子标记
《浙江农业学报 》 2010 北大核心 CSCD
摘要：用番茄抗黄化曲叶病毒病品系‘T0727’与高感黄化曲叶病毒病品系‘T9179’配制杂交组合,接种鉴定其F1代及F2代分离群体的黄化曲叶病毒病发生情况。用64对EcoRⅠ/MseⅠ引物组合对‘T0727’、‘T9179’两个亲本及其F1代和F2代抗病和感病基因池进行AFLP分析,共扩增出4 023条可分辨的条带,其中3条为稳定的差异。用‘T0727’和‘T9179’杂交产生的F2代分离群体对3个特异条带与目的基因的遗传连锁性进行分析,发现特异条带E-ACC/M-CAG与抗黄化曲叶病毒病基因紧密连锁,二者之间的遗传距离为9.5 cM。将E-ACC/M-CAG片段回收、克隆和测序,成功地将其转化为SCAR标记,暂定名为Afty-196,可以用于对番茄黄化曲叶病毒病基因的标记辅助选择。
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低温对白菜幼苗叶绿素荧光参数日变化的影响
《北方园艺 》 2010 北大核心
摘要：选用不同耐冷性的2个大白菜材料"534"和"676",利用低温胁迫在植株不出现明显受迫症状的前提下,比较胁迫期和恢复期的叶绿素荧光参数差异。结果表明:低温胁迫使耐冷性弱的"534"Fv/Fm、qP的降幅均比耐冷性强的"676"明显。在胁迫期,"534"、"676"的qN均升高,同时"676"升幅比"534"明显,且2个品种的Yield日变化对低温胁迫的响应差异不明显。经历了3 d恢复后,"676"Fv/Fm、qP的恢复幅度明显高于"534"。但在恢复期2个品种的Yield日变化对低温胁迫后恢复差异不明显。说明"534"在胁迫期受低温的影响较大,"676"在低温胁迫解除后较快得到恢复,这些参数可作为反映品种耐冷能力大小的指标。
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保健食品中大蒜素色谱检测方法的研究
《分析测试学报 》 2010 北大核心 CSCD
摘要：以固体类、液体类、半固体类3类保健食品为研究对象,建立了气相色谱法测定保健食品中大蒜素的主要功效成分二烯丙基三硫醚(DATS)、二烯丙基二硫醚(DADS)含量的检测方法。考察了不同提取溶剂、提取方式、提取温度、提取时间的影响,并对3类保健食品样品进行高低两水平的加标回收实验。试样以丙酮水溶液(体积比8∶2)恒温水浴(超声)提取,经PEG-20M色谱柱(30 m×0.32 mm×0.5μm)分离,氢火焰离子化检测器(FID)测定,内标法计算含量。DATS与DADS的检出限分别为5.0、1.5 mg/kg,加标回收率分别为91%~109%、91%~108%。重复性RSD为2.6%~3.1%,再现性RSD为4.1%~8.4%。将该法与HPLC相比较,结果无显著性差异。该方法简便快速,结果准确可靠,适用于多种保健食品中大蒜素含量的检测。
关键词： 大蒜素 气相色谱法 氢火焰离子化检测器(FID) 保健食品
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酶法制备小黄鱼下脚料调味料的风味前体物质
《食品科学 》 2010 北大核心 CSCD
摘要：以小黄鱼下脚料为原料,利用酶解技术获得小黄鱼下脚料风味前体物质,通过单因素及响应面分析,确定碱性蛋白酶(Alcalase)和风味蛋白酶(Flavourzyme)同步酶解工艺,研究料水比、酶解时间、酶用量、初始pH值和酶解温度对酶解液水解度和感官品质的影响。结果表明,优化的酶解工艺条件为料水比1:7(g/mL)、酶解温度55℃、酶解时间6.5h、初始pH8.0、Alcalase用量2.5%、Flavourzyme用量3.0%。在此酶解条件下的水解度为40.11%,所得酶解液中氨基酸含量86.383g/100g,其中必需氨基酸32.785g/100g,鲜味和甘味氨基酸38.384g/100g,与酶解前相比氨基酸含量明显增加,氨基酸总量增加了67.56%,其中必需氨基酸增加了82.02%,呈味氨基酸增加了79.52%,产品具有浓郁的小黄鱼鱼香味。
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农杆菌介导的甜瓜蔓枯病菌遗传转化体系的建立
《生物工程学报 》 2010 北大核心 CSCD
摘要：甜瓜蔓枯病是当前危害瓜类的主要病害,严重影响甜瓜的产量和品质,但是蔓枯病菌Didymella bryoniae病原学研究还非常落后,关于该菌功能基因的研究还未见报道。本研究以携带潮霉素B磷酸转移酶基因(hph)的pBIG2RHPH2作为转化载体,根癌农杆菌C58C1作为转化介体,转化甜瓜蔓枯病菌的强致病菌株DB11。研究发现,甜瓜蔓枯病菌的最优转化体系为:甜瓜蔓枯病菌的分生孢子悬浮液浓度为1×106个孢子/mL,农杆菌悬浮液OD600为0.15,共培养时间48h,诱导培养基中添加200μg/mL乙酰丁香酮,选择培养基添加100μg/mL潮霉素B、200μg/mL头孢噻肟钠、200μg/mL氨苄青霉素和200μg/mL四环素。1×105个蔓枯病菌分生孢子可以产生45个左右的转化子,随机挑取3个转化子进行PCR和RT-PCR检测发现,在不含潮霉素B的PDA培养基平板上转化子连续培养5代后,hph基因仍能稳定存在和转录,Southern blotting检测发现,T-DNA都是单拷贝插入3个转化子的染色体内。本研究建立的甜瓜蔓枯病菌的转化体系将为该病菌的功能基因研究和寄主与病原菌的互作研究提供重要技术支撑。
关键词： 甜瓜蔓枯病菌 根癌农杆菌介导的转化 T-DNA插入突变
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兔多杀性巴氏杆菌株外膜蛋白A基因克隆及序列分析
《浙江农业学报 》 2010 北大核心 CSCD
摘要：参考GenBank中登录的多杀性巴氏杆菌序列设计了一对特异性引物,采用PCR方法分别扩增出兔多杀性巴氏杆菌C51-2-499株、C51-3-500株的OmpA全长片段,克隆到pMD18-T载体上进行序列测定和分析。结果表明:OmpA全长1.068 kb,含有一个1.068 kb的开放阅读框(ORF),编码353个氨基酸,相对分子量为37 969.8 kD,等电点pI为8.90。与6株参考菌株比较,核苷酸同源性为89.7%~99.1%,氨基酸同源性为82.9%~98.6%。
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鸡Cacna1s基因部分序列的克隆及分析
《中国家禽 》 2010 北大核心
摘要：利用PCR方法首次克隆了鸡Cacna1s基因5′-部分调控区和exon1共1863bp的序列,该序列已提交GenBank,登录号为GQ184725。同源性比对发现,鸡Cacna1s基因exon1与哺乳动物同源性较高,其核苷酸相似性在72.4%～77.0%,氨基酸相似性在66.0%～72.0%。鸡Cacna1s基因exon1较哺乳动物插入了9个碱基,分别编码1个高疏水性的缬氨酸和2个高亲水性的天冬氨酸和赖氨酸。Cacna1s基因部分序列的克隆,可为下一步在鸡上开展此基因与肉质和屠体性状的关联性研究奠定基础。
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