科研产出
菠萝凋萎相关病毒–2实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立
《园艺学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：菠萝凋萎相关病毒(Pineapple mealybug wilt associated virus-2,PMWaV-2)是引起的菠萝凋萎病(Mealybug wilt of pineapple,MWP)的重要病原。本研究中根据PMWaV-2外壳蛋白基因序列设计特异性引物和探针,建立基于TaqMan探针的实时荧光定量RT-PCR检测方法。该方法能高灵敏检测出阳性样品,对阴性样品及空白对照均无荧光反应;灵敏度比普通PCR高100倍;重复性试验表明批内和批间变异系数均在1.85%以内,表明本方法是一种操作简便、特异性强、灵敏度高、重复性较好的PMWaV-2定量检测方法。
关键词： 菠萝 菠萝凋萎病毒–2(PMWaV-2) TaqMan探针 实时荧光定量RT-PCR 检测
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中国南方地区旱作农业发展概况与对策分析
《中国农学通报 》 2014 CSCD
摘要：近年来中国南方地区频繁遭遇干旱,给农业生产和人民生活造成了巨大危害。为促进中国南方地区旱作农业的发展,保障南方地区粮食和经济作物安全,总结了中国南方地区旱作农业发展的现状、意义;重点分析了南方地区旱作农业发展中存在的主要问题;提出了南方旱作农业发展的主要对策:加强农田工程建设、选育抗旱品种、加强抗旱保水技术的开发和应用、利用节灌补水技术,提高水资源利用率。
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知母种苗质量分级标准研究
《种子 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：目的:探讨知母种苗质量分级标准,为知母药材规范化生产奠定基础。方法:在对知母道地产区1年生种苗的调查与测定基础上,以种球直径和侧根数为分级指标,采用K-聚类法并结合生产实践对知母种苗进行分级,进一步通过田间栽培比较试验对划分的等级进行验证。结果与结论:初步制定知母种苗的3个等级,一等种苗:种球直径≥15.0 mm,侧根数≥16个;二等种苗:10.0 mm≤种球直径<15.0 mm,11个≤侧根数<16个;三等种苗:7.0 mm≤种球直径<10.0 mm,7个≤侧根数<11个。
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一种高效提取普通小球藻叶绿体DNA的新方法
《植物生理学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：本文采用尿素-月桂酰肌氨酸钠(urea-sarkosyl)法,用于分离带有坚硬细胞壁小球藻的高纯度叶绿体DNA(cpDNA)。将对数生长期的小球藻收集后置于冰上研磨,percoll密度梯度离心收集叶绿体层,显微观察表明叶绿体经梯度离心后形态完整。采用尿素-月桂酰肌氨酸钠法、蛋白酶K消化及酚/氯仿/异戊醇抽提,获得了高纯度的cpDNA。检测结果显示,cpDNA分子长度为22 kb,A260:A280值为1.87±0.01,产率达(2.52±0.01)μg·g-1(DW);cpDNA编码的16S rDNA扩增呈阳性,而由细胞核编码的18S rDNA扩增呈阴性。表明cpDNA纯度高,没有受到核基因组DNA的污染,符合小球藻cpDNA高通量测序的要求。同时,该方法也适合提取具有相似细胞壁成分的其他微藻的基因组DNA和cpDNA。
关键词： 普通小球藻 叶绿体DNA 尿素 月桂酰肌氨酸钠 percoll分离液
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几种杀虫剂对豆大蓟马的毒力测定及复配增效作用
《热带作物学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：豆大蓟马是海南冬种豇豆的重要害虫,严重影响豇豆产品质量和商品价值。本文采用离心管药膜法,测定了毒死蜱、阿维菌素、高效氯氰菊酯、甲氨基阿维菌素苯甲酸盐、吡虫啉和啶虫脒等6种杀虫剂对豆大蓟马的毒力,并测定了甲氨基阿维菌素苯甲酸盐与其它5种杀虫剂复配的增效作用及最佳配比。结果表明:供试药剂对豆大蓟马毒力(LC50)大小顺序为:甲维盐(0.000 5 g/L)>阿维菌素(0.056 1 g/L)>毒死蜱(0.125 3 g/L)>高效氯氰菊酯(0.165 4 g/L)>啶虫脒(0.228 3 g/L)>吡虫啉(19.803 5 g/L);以甲氨基阿维菌素苯甲酸盐与毒死蜱复配的共毒系数为776;甲氨基阿维菌素苯甲酸盐与毒死蜱配比为1∶9时的共毒系数为1 733。本研究为开发豆大蓟马防治药剂和田间化学防治提供了基本资料。
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香蕉胚性悬浮细胞遗传转化体系的优化
《分子植物育种 》 2014 CSCD
摘要：本研究在前人研究的基础上,以海南主栽品种‘巴西’香蕉胚性悬浮细胞为材料,对其遗传转化体系进行优化。结果表明:‘巴西’香蕉胚性悬浮细胞对卡那霉素有一定抗性,适合作为转化细胞筛选的抗生素及浓度为潮霉素10 mg/L、Basta 0.5 mg/L;悬浮细胞每2周继代1次,继代5~6 d后,侵染液农杆菌OD600为0.4,侵染6 h直接进行筛选,再生植株转化率较高,分子检测显示75%为阳性植株;将植物表达载体pCAMBIA3301转入香蕉,转化植株对除草剂的抗性明显提高。
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橡胶树AGPase一个大亚基cDNA全长克隆及表达分析
《热带作物学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：ADP葡萄糖焦磷酸化酶(AGPase)是淀粉合成起始的关键酶,利用保守序列设计简并引物,得到一条橡胶树AGPase大亚基的类似序列,再以木质部cDNA为模板通过RACE(Rapid amplification of cDNA ends)技术克隆得到AGPase基因的cDNA全长,命名为HbLSUI(GenBank NO:KJ020930)。生物信息学分析结果表明,AGPase基因所编码的蛋白具有AGPase大亚基保守结构域。RT-PCR表达分析结果表明,AGPase基因在木质部和树皮中的表达量较高。利用荧光定量PCR分析AGPase基因在不割胶、常规割胶和乙烯刺激割胶3种割胶强度下的表达情况,结果表明,割胶和刺激割胶可导致该基因的表达量降低。
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橡胶灵芝化学成分研究
《中国中药杂志 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：利用硅胶柱色谱和Sephadex LH-20凝胶柱色谱技术对橡胶灵芝Ganoderma philippii进行化学成分研究,从中分离到16个化合物,通过波谱方法分别鉴定为2,5-二羟基苯乙酮(1),甲龙胆酸(2),(S)-苹果酸二甲酯(3),muurola-4,10(14)-dien-11β-ol(4),dihydroepicubenol(5),5-羟甲基呋喃甲醛(6),麦角甾-7,22E-二烯-3β-醇(7),麦角甾-7,22E-二烯-3-酮(8),麦角甾-7,22E-二烯-2β,3α,9α-三醇(9),6β-甲氧基麦角甾-7,22E-二烯-3β,5α-二醇(10),麦角甾-4,6,8(14),22E-四烯-3-酮(11),麦角甾-4,6,8(14),22E-四烯-3β-醇(12),5α,8α-过氧桥麦角甾-6,22E-二烯-3β-醇(13),7α-甲氧基-5α,6α-epoxy麦角甾-8(14),22E-二烯-3β-醇(14),麦角甾-8,22E-二烯-3β,5α,6β,7α-四醇(15),麦角甾-5,23E-二烯-3β-醇,醋酸盐(16)。化合物1~16均首次从橡胶灵芝中分离得到,其中化合物4,5首次从灵芝属分离得到。
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响应面法优化绿色木霉H06产孢培养条件
《广东农业科学 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：在单因素试验的基础上,采用响应面法(response surface methodology,RSM)对绿色木霉菌H06菌株产孢培养条件进行了优化。首先利用Plackett-Burman试验设计筛选出影响产孢的3个主要因素:装液量、接种量和培养温度。在此基础上运用最陡爬坡路径法逼近最大响应值区域,最后利用响应面分析法确定主要因子之间的交互作用及最佳条件。结果显示,绿色木霉H06菌株的最佳发酵条件为:转速200 r/min,装液量74.70 mL/250mL,接种量5.83%,pH 7.5,温度29.50℃,培养时间72 h,菌龄48 h。H06菌株最大理论孢子含量为7.64×109个/mL。经3次平行试验验证,实际平均孢子含量与预测孢子含量相近,比之前的孢子含量提高133%。
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