科研产出
象耳豆根结线虫纤维素结合蛋白Me-cbp-1基因的克隆与功能分析
《农业生物技术学报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：纤维素结合蛋白(cellulose binding protein,CBP)是植物寄生线虫在侵染过程中分泌的重要效应蛋白。为了获得象耳豆根结线虫(Meloidogyne enterolobii)纤维素结合蛋白序列信息、并分析其在线虫寄生致病过程中的功能地位,本研究利用已构建的象耳豆根结线虫二龄幼虫转录组数据库,结合cDNA末端快速扩增(rapid-amplification of cDNA ends,RACE)技术克隆了象耳豆根结线虫纤维素结合蛋白基因Me-cbp-1(Gen Bank登录号:KU350655)cDNA全长序列。生物信息学分析表明,Me-cbp-1 cDNA全长809bp,其5'末端和3'末端的非编码区长度分别为43和139 bp,以及含有1个长度为627 bp的完整开放阅读框(ORF),推导编码208个氨基酸。预测蛋白Me-cbp-1含有起分泌功能的信号肽结构和纤维素结合结构域。同源性搜索比对分析表明,象耳豆根结线虫Me-cbp-1与南方根结线虫(M.incognita)、爪哇根结线虫(M.javanica)及花生根结线虫(M.arenaria)纤维素结合蛋白具有88%~91%的相似性。原位杂交显示,Mecbp-1在象耳豆根结线虫二龄幼虫的亚腹食道腺细胞特异表达。利用RNAi技术对象耳豆根结线虫二龄幼虫的Me-cbp-1基因进行沉默后,导致二龄幼虫的侵染率显著降低。本实验结果初步证明了纤维素结合蛋白在象耳豆根结线虫二龄幼虫侵染寄主的过程中具有重要地位,推测其通过与细胞壁主要成分纤维素结合,促进植物细胞壁的软化和降解,从而有利于提高线虫的侵染和寄生能力。本研究为揭示象耳豆根结线虫分子寄生致病机制以及进一步研究防治根结线虫病害新策略提供了理论依据。
关键词： 象耳豆根结线虫 纤维素结合蛋白 原位杂交 RNA干扰
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橡胶树胶孢炭疽菌P型ATP酶基因CgATPase 01的敲除及表型分析
《热带作物学报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：为了了解橡胶树胶孢炭疽菌的一个钙转运P型ATP酶基因Cg ATPase01的功能,本研究利用Splitmarker技术构建敲除载体,通过PEG介导原生质体转化对橡胶树胶孢炭疽菌菌株HBCg01的Cg ATPase 01基因进行敲除,根据表型变化及致病性检测对其功能进行分析。结果表明:通过Split-marker方法获得了敲除突变体△Cg ATPase01,表型分析发现该突变体与野生菌株间存在明显差异,病菌气生菌丝的颜色发生了改变,生长速率降低,产孢量下降,对橡胶树叶片的致病性减弱,推测该基因可能在橡胶树胶孢炭疽菌的产孢、生长发育和致病性等方面具有重要作用。本研究结果为进一步研究胶孢炭疽菌P型ATP酶基因功能和病原菌的致病机理奠定了基础。
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5种石油醚前处理对不同植物样品黄酮含量测定的影响
《热带农业工程 》 2017
摘要：为了解不同石油醚前处理对植物黄酮含量测定的影响,用70%乙醇提取、芦丁硝酸铝亚硝酸钠比色法,对经过5种石油醚前处理的不同植物样品中黄酮含量进行比较研究,结果表明:经石油醚索氏回流前处理的样品提取液颜色较浅且沉淀较少;先提取再石油醚萃取处理的各样品黄酮含量测定值均异常高于其他4种处理;经CK、石油醚超声30 min、石油醚浸泡15 h前处理的乌蕨、广金钱草样品黄酮得率均有所提高,但地胆头和鸡骨草则有升也有降;进一步检验分析发现,若待测液有未除尽的石油醚,则会而造成测定值偏高。结论:石油醚前处理未必能提高植物样品黄酮得率,也不会造成黄酮的显著损失,在一般的植物黄酮含量测定中其并非必要程序,但若采用了该程序则应在黄酮含量测定前除去待测液中余存的石油醚以排除干扰。
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香蕉及土壤中吡唑醚菌酯和戊唑醇残留的高效液相色谱分析
《吉林农业 》 2017
摘要：采用高效液相色谱方法,分析吡唑醚菌酯和戊唑醇在香蕉及土壤中的残留。香蕉与土壤样品用乙腈提取,用CNW/NH2固相萃取柱对香蕉及土壤中吡唑醚菌酯和戊唑醇进行净化,正己烷/丙酮作固相萃取淋洗液,并优化净化方法及其色谱条件,采用高效液相色谱仪——紫外检测器进行测定。结果表明:吡唑醚菌酯和戊唑醇的检出限分别为0.01mg/kg、0.025mg/kg。当添加水平为0.01~0.2mg/kg时,吡唑醚菌酯在香蕉全焦、焦肉及土壤中的平均回收率为90%~102%,相对标准偏差为0.9%~6.9%。当添加水平为0.025~0.5mg/kg时,戊唑醇在香蕉全焦、焦肉及土壤中的平均回收率为82%~102%,相对标准偏差为1.4%~6.6%。
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海南省冬季蔬菜病毒病发生情况调查
《热带农业科学 》 2017
摘要：病毒病是海南冬季蔬菜生产上的一类重要病害,发生为害日趋严重。通过对海南17个市县88个乡镇冬季蔬菜病毒病发生情况调查,同时采用ELISA或PCR方法对田间采集的1 385份样本进行病毒检测,结果表明:病毒病发生严重程度依次为黄瓜>辣椒>小白菜>南瓜>樱桃番茄>菜豆>豇豆。150份黄瓜样本中,CMV、CGMMV和TMV检出率分别为63.3%、22.67%和21.33%;180份南瓜样本中,CMV、TMV和CGMMV检出率分别为53.89%、5%和1.12%;220份辣椒样本中,CMV、TMV和TSWV检出率分别为49.1%、41.4%和1.53%;170份樱桃番茄样本中,TMV、CMV、BBWV和粉虱传双生病毒检出率分别为40%、34.7%、1.18%和3.53%;350份小白菜样本中,Tu MV和CMV检出率分别为49.1%和20.9%;130份菜豆样本中,CMV和BBWV检出率分别为30%和12.3%;195份豇豆样本中,CMV和BBWV检出率分别为9.2%和2.6%。CMV可以侵染已检测的4个科的所有蔬菜种类,检出率在9.23%~63.33%。已检测的所有蔬菜种类中,均存在2种或2种以上病毒的混合侵染,混合侵染率在0.56%~26.36%。
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农田环境信息无线传感网络系统设计与开发
《热带农业工程 》 2017
摘要：设计了一种基于Zigbee的农田环境信息无线传感网络系统,由Zigbee网关、Zigbee节点、传感调理电路和光伏供电系统组成,实现了野外开放式种植环境下的环境参数(包括土壤温湿度、空气温湿度、土壤pH值、二氧化碳浓度和光照强度等典型参数)的实时采集与无线传输。Zigbee网关集成了Zigbee节点管理与移动网络通信,通过移动网络与农产品精准生产管理系统完成实时信息交互,实现了野外开放式农田的环境信息实时监测与无线传输,提高了种植的信息化水平,为精细化农业生产提供了可靠的技术手段。
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枯草芽孢杆菌防治甜瓜白粉病效果及对甜瓜生长的影响
《中国植保导刊 》 2017 北大核心
摘要：为探讨枯草芽孢杆菌对甜瓜白粉病的田间防控效果,以50%嘧菌酯水分散粒剂为对照,在甜瓜白粉病初期喷施不同浓度的200亿个活芽孢/g枯草芽孢杆菌可湿性粉剂。调查应用效果发现,该枯草芽孢杆菌制剂与嘧菌酯防效相当。施药处理后14 d,200亿个活芽孢/g枯草芽孢杆菌可湿性粉剂100倍液和500倍液对甜瓜白粉病的防效分别达96.72%和81.40%;对甜瓜株高、叶面横径、叶面纵径、果实横径、果实纵径和果实糖度指标的促生作用分别达24.28%~31.78%、36.85%~50.08%、42.42%~52.21%、61.14%~69.14%、39.58%~49.12%、23.29%~29.86%。
关键词： 枯草芽孢杆菌可湿性粉剂 甜瓜白粉病 田间防控 促生作用
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改进的变色酸分光光度法测海南粗榧生物碱总碱含量
《江苏农业科学 》 2017 北大核心
摘要：以传统测定海南粗榧生物碱的方法为对照,参照改良的测甲醛含量的方法对其进行优化,以建立安全、快捷、准确测定海南粗榧生物碱总碱含量的新方法。结果表明,新方法兼备以上2种方法的优点,同时又避免了其缺点,具体表现为(1)用磷酸、过氧化氢取代98%浓硫酸,更安全;(2)用微波加热取代水浴加热,更快捷;(3)增加了挥发干甲醇溶剂的试验步骤,排除了甲醇溶剂的干扰,更准确;(4)试验进一步明确了最佳加热时间为35 s,最佳检测波长为558 nm。结果还表明,新方法在0~20μg/mL范围内,三尖杉碱标准曲线回归方程为y=0.018 4x,线性相关系数r=0.999 5;重复性检测样品的RSD=0.59%;标样回收率98.85%~106.86%,且24 h内显色稳定,测定结果与传统方法无显著差异。综上,新方法安全、快捷、可靠,可作为测定海南粗榧生物碱总碱含量的新方法。
关键词： 生物碱 总碱含量 海南粗榧 变色酸分光光度法 测定方法改进
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67份柱花草耐盐性综合评价
《热带作物学报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：采用水培的方法,在200 mmol/L Na Cl胁迫条件下对23个不同种的67份柱花草(Stylosanthes Sw.)进行耐盐性评价。盐处理15 d后对枯叶率(WLR)、相对生长量(RG)、叶绿素(Chl)含量和相对含水量(RWC)进行测定。结果表明:柱花草不同种及同一种的不同材料间耐盐能力存在显著差异;相关分析表明,WLR与Chl含量、RG及RWC呈显著负相关,相关系数分别为0.87、0.78及0.59,而FW与Chl含量呈显著正相关,相关系数达0.72。主成分分析得到2个主成分,可以解释总变化的89.83%。隶属函数法耐盐能力排序及聚类分析表明,直立柱花草CIAT11900、马弓形柱花草Fine stem、有钩柱花草CIAT1010、灌木黏质柱花草CIAT11052、弱脉柱花草CIAT11927和有钩柱花草Verano的耐盐性最强,有望在滨海盐渍土的改良中应用。
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