科研产出
海南椰衣(椰糠)栽培介质主要理化特性分析
《热带作物学报 》 2011 CSCD
摘要：以海南3市(县)5镇的椰糠为材料,对不同地域椰糠的容重(BD)、总孔隙度(TP)、阳离子交换量(CEC)、大小孔隙比(RLSP)、持水空隙度(WFP)、通气空隙度(AP)、灰分含量(AC)、pH值及EC值等理化特性及其相关性进行研究。结果表明:椰糠BD和TP的范围分别为0.09～0.25 g/cm3和73.00%～86.00%,pH、EC值和CEC的范围分别在4.50～7.00、1.35～3.60 mS/cm、32.40～55.00 mol/hg之间,RLSP、AP、WFP和AC的范围分别在0.03%～0.13%、2.60%～8.20%、70.00%～82.00%、6.00%～51.00%之间。对不同地域的椰糠理化特性的相关性分析表明,BD分别与EC、pH、AC,TP与AP,RLSP与WFP,pH与EC,EC与AC,AC与pH呈极显著正相关;TP与BD,RLSP与AP,WFP与AP,AC与TP呈极显著负相关;BD与AP,CEC与EC、pH,RLSP与AC呈显著负相关。
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橡胶树内生拮抗细菌菌株Czk1的发酵条件优化
《热带作物学报 》 2011 CSCD
摘要：从橡胶树根部分离出1株枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)菌株Czk1,通过室内平皿对峙试验结果表明,菌株Czk1对所参试的5种橡胶树不同的根病菌都具有很强的拮抗作用,同时也对8个其他作物上发生的常见病原菌都有非常强的拮抗作用。通过单因子和正交试验法对菌株Czk1的培养基进行优化,获得的最佳培养基配方为:2%的葡萄糖、1%的酵母浸粉+胰蛋白胨+氯化铵(2∶2∶1)、0.3%磷酸氢二钠+0.1%的磷酸二氢钠,碳氮比为2∶1。在确定适合该菌株的培养基组分基础上,对其培养基进行优化试验,结果显示,该菌株的最佳培养条件为:培养温度33℃,初始pH值7.5,转速200 r/min,培养时间24 h,初始接种量5%,通气量100 mL。
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一株拮抗香蕉枯萎病菌的链霉菌分离和鉴定
《热带作物学报 》 2011 CSCD
摘要：从海南温泉中分离到1株对香蕉枯萎病病原菌4号小种有强拮抗作用的链霉菌菌株HW1,对该菌株进行了形态特征、培养特征、生理生化特征及16S rDNA序列分析。并对该菌株和香蕉枯萎病病原菌4号小种在土壤中进行了不同温度下的共培养试验。结果表明,其在PDA培养基上,内生菌丝无横隔、不断裂;孢子圆形,簇聚在气生菌丝上。在PDA培养基上,菌落生长开始为白色,培养成熟后,气丝逐渐由白色变灰,最后因为产生孢子变为褐色,并可产黄色可溶色素。以16S rDNA序列为基础构建了菌株HW1的系统发育树,其与模式链霉菌株的16S rDNA序列的同源性为99%。初步将该菌株鉴定为Streptomyces costaricanus。HW1菌株和香蕉枯萎病病原菌4号小种在土壤中的共培养试验表明,HW1菌株在45℃温度的生长环境中,表现出对香蕉枯萎病病原菌较好的抗性。
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香蕉束顶病毒海口分离物Rep基因的克隆、原核表达、抗血清制备及检测
《植物保护 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：[目的]对香蕉束顶病毒(Banana bunchy top virus,BBTV)海口分离物起始蛋白(replication initiation pro-teins,Rep)基因进行克隆、原核表达、抗血清制备,为BBTV有效的检测及分子流行病学等研究奠定基础。[方法]以海口地区染病香蕉幼嫩假茎和叶片的总DNA为模板,通过PCR技术克隆BBTV海口分离物的起始蛋白基因,连接到表达载体并进行大肠杆菌原核表达,制备高效价特异性抗血清。[结果]应用PCR方法从染毒香蕉幼嫩假茎和叶片总DNA中扩增复制rep基因,回收目的片段后经酶切,获得了含BBTV Rep基因的重组质粒pET32b-Rep。将重组质粒转化E.coliBL21(DE3),经不同的时间、温度及IPTG浓度优化,12%SDS-PAGE电泳分析,在20℃、0.1 mmol/L IPTG条件诱导4h,最终获得大量的可溶性融合蛋白。将可溶性蛋白上清液经Ni2+-NTA亲和层析柱纯化,得到高纯度的融合蛋白。用纯化后的融合蛋白免疫家兔,获得了BBTV Rep蛋白抗血清。以融合蛋白做抗原,间接ELISA法测定抗血清效价大于125 000。以田间样品做抗原时,结果表明抗血清最佳工作浓度为1∶1 000。Western blot鉴定结果表明抗血清能与融合蛋白特异性结合。[结论]利用Rep基因制备的特异性抗血清在BBTV病毒粒体的组装机制研究及病毒病诊断上具有重要的应用价值。
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辣椒采后灰霉病拮抗细菌的分离及生防效果
《热带作物学报 》 2011 CSCD
摘要：为了降低辣椒采后由灰霉病引起的腐烂损失,从辣椒植株内分离筛选拮抗菌,结果获得6株对辣椒灰霉病菌有较强抑制作用的内生细菌,其中PL58菌株的抑菌活性最强,在平板上培养3d后抑菌圈直径大于39 mm,培养7 d后对辣椒灰霉病菌的抑制率达55.1%,该菌株初步鉴定为芽孢杆菌,其拮抗作用有一定的广谱性。该菌株的发酵液(1.0×109 cfu/mL)对辣椒灰霉病菌菌丝生长和孢子萌发均有较强的抑制作用,但其无菌滤液没有抑制作用。该菌株在辣椒果实上对灰霉病的拮抗效果最高达78%,辣椒果实在25℃下贮藏25 d后该菌株的生防效果仍有37.2%。因此,PL58菌株可以作为一种生防菌应用于辣椒采后灰霉病的防治。
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橡胶树铜转运蛋白基因的克隆及在健康树与死皮树中的差异表达
《热带作物学报 》 2011 CSCD
摘要：铜转运蛋白(Copper transporter,COPT)属于CTR/COPT铜转运家族,参与调节生物体内铜的动态平衡。根据抑制性消减杂交文库分离的EST片段,采用3'-RACE技术从巴西橡胶树胶乳中获得HbCOPT5基因的全长cDNA序列,其ORF长420 bp,共编码139个氨基酸,预测HbCOPT5蛋白分子量为15.67 ku,等电点为5.26,含有3个跨膜区。进化树分析结果表明,HbCOPT5与蓖麻、杨树中的COPT蛋白亲缘关系最近;在拟南芥的6个COPT蛋白中,与AtCOPT5的亲缘关系最近。RT-PCR结果显示,健康植株中HbCOPT5的表达量是死皮树中的2.8倍。
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不同提取剂对油棕果皮中花色苷稳定性的影响
《热带作物学报 》 2011 CSCD
摘要：研究蒸馏水、0.8%柠檬酸提取液、60%酸性乙醇3种提取剂对油棕嫩果皮中花色苷稳定性的影响。结果表明,酸性乙醇对油棕嫩果皮花色苷的提取率最高,达到542μg/g;3种提取液在272 nm处有最大吸收峰,提取液中的组分均易溶于甲醇和丙酮;3种花色苷提取液在颜色的变化上随pH值变化一致;在日光照射和室内自然光条件下,花色苷柠檬酸提取液较为稳定,酸性乙醇提取液次之,蒸馏水提取液最差;在4~100℃的温度范围内,花色苷柠檬酸提取液较为稳定;蔗糖和葡萄糖添加量为20%时,对花色苷提取液基本无影响;花色苷柠檬酸提取液受金属离子影响较大,锌离子对花色苷提取液具有增色作用。
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4种热带灌木饲用价值研究
《西南农业学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：测定了银合欢、大叶千斤拔、木豆和假木豆等4种常见热带灌木的主要营养成分和单宁含量及在舍饲条件下海南黑山羊对4种供试植物的采食量,采用饲料相对值RFV(Relative Feed Value)和粗饲料分级指数GI(Grading Index)对4种热带灌木的饲用品质进行了评定,并对干物质采食量与供试植物营养成分和单宁含量作了相关性分析。结果表明:2种评定体系分析表明,4种供试植物都有较高的饲用价值,且其在2种评定体系中的排序完全一致;海南黑山羊对热带灌木的采食量显著受到植物中干物质、粗灰分、酸性洗涤纤维、单宁含量的影响,海南黑山羊对干物质含量高且单宁含量低的植物有较高的采食量。
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辣椒MADS-box基因CaMADS的及表达分析
《热带作物学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：根据植物MADS-box基因的保守区设计简并引物,进行PCR扩增获得一个辣椒MADS-box基因片段,在此基础上通过RACE方法获得了辣椒编码MADS-box基因的cDNA序列(命名为CaMADS).序列分析结果表明,CaMA DS基因全长943 bp,含有744 bp的阅读框,25bp的5'-UTR和174 bp的3'-UTR,编码247个氨基酸,分子量为28.7 ku,等电点为9.32,含有保守的MADS-box结构域.半定量RT-PCR分析结果表明CaMA DS在花和叶中微量表达,在果实中随着果实的成熟,CaMA DS的表达量增加,表明CaMA DS与辣椒的果实成熟相关.
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