紫花苜蓿锌指蛋白基因RNAi表达载体的构建及在苜蓿的转化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 秦智慧

作者： 秦智慧;晁跃辉;杨青川;康俊梅;孙彦;王凭青;龙瑞才

作者机构：

关键词： 紫花苜蓿;锌指蛋白;RNAi;转基因

期刊名称： 作物学报

ISSN： 0496-3490

年卷期： 2010 年 36 卷 04 期

页码： 596-601

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据紫花苜蓿锌指蛋白MsZFN基因(GenBank登录号为EU624138)序列,设计两对含有酶切位点的特异性引物,以紫花苜蓿cDNA为模板,分别合成用于构建干扰载体的正反义片段,将正反义片段分别插入表达载体pART27的相应位置,构建成含有发夹结构的RNAi载体pART-F-R。利用农杆菌介导方法,将pART-F-R转化到紫花苜蓿中,经过PCR检测,获得了3株转基因植株。经过RT-PCR检测,证明转基因植株中MsZFN基因表达量明显低于未转基因的植株。结果表明,已构建成功具有发夹结构的RNAi载体pART-F-R,它可有效的抑制紫花苜蓿MsZFN基因。

分类号： S541.9

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