稳定表达脑心肌炎病毒先导蛋白N_2a细胞系的建立与鉴定
文献类型: 中文期刊
第一作者: 邹云婧
作者: 邹云婧;林密;袁万哲;孙继国
作者机构:
关键词: 脑心肌炎病毒(EMCV);先导蛋白;N2a细胞系
期刊名称: 病毒学报
ISSN: 1000-8721
年卷期: 2017 年 04 期
页码: 524-529
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 为建立稳定表达脑心肌炎病毒先导蛋白的N_2a细胞系,本研究应用脂质体介导DNA转染法,将表达脑心肌炎病毒(EMCV)先导(L)蛋白的重组质粒pNTAP-B-L转染至N_2a细胞中,通过筛选G418抗性单克隆细胞,建立能够稳定表达融合蛋白TAP tag-L的N_2a细胞系;利用免疫印迹试验(Western blotting)和间接免疫荧光试验(IFA)对融合蛋白TAP tag-L的表达及细胞内定位情况进行鉴定检测。结果表明EMCV的L基因已经整合进N_2a细胞基因组DNA中且L蛋白在获得的阳性N_2a细胞中稳定表达,表达产物TAP tag-L主要分布在细胞浆内。建立的稳定表达L蛋白的N_2a细胞系,为进一步研究先导蛋白功能及EMCV感染过程中与宿主细胞(N_2a)相互作用蛋白的筛选奠定了基础。
分类号: S852.65
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