火鸡疱疹病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 刘杉杉

作者： 刘杉杉;孙伟;闫敏鑫;黄秀芬;姜良;何诚;李永清

作者机构：

关键词： 火鸡疱疹病毒;SYBR GreenⅠ;实时荧光定量PCR;sorf1

期刊名称： 动物医学进展

ISSN： 1007-5038

年卷期： 2015 年 02 期

页码： 16-20

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 针对火鸡疱疹病毒(HVT)特异性的sorf1区基因序列设计引物,建立检测HVT的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法,并对其特异性、敏感性和重复性进行检测。结果表明,建立的实时荧光定量PCR方法标准曲线的循环阈值(Ct)与模板拷贝数呈良好线性关系(r2=0.99),熔解曲线分析显示该PCR扩增具有良好的特异性、敏感性和重复性,试验表明该方法最低检测浓度为7×101拷贝/μL。利用该方法对野生型HVT和rHVT-pmpD-N在体内和体外的复制特性进行检测,结果表明重组后的HVT与野生型HVT的增殖速度基本一致。本试验建立的检测方法能够快速检测HVT,准确率高,特异性好,具有较高的灵敏度和稳定性,为监测HVT体内和体外的病毒含量和复制情况提供了一种有效的手段。

分类号： S852.65

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