旋毛虫肌幼虫p53cDNA的克隆及鉴定

文献类型: 中文期刊

第一作者: 孙树民

作者: 孙树民;吴秀萍;王学林;付宝权;卢强;李莲瑞;郭恒;P.Boireau;陈启军;刘明远

作者机构:

关键词: 旋毛虫;p53cDNA;克隆;表达;抗原性

期刊名称: 中国兽医学报

ISSN: 1005-4545

年卷期: 2007 年 27 卷 04 期

页码: 532-535

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 根据GenBank中旋毛虫53000抗原基因的序列设计引物,用PCR技术直接从旋毛虫肌幼虫cDNA文库中扩增靶基因p53 cDNA,将其克隆到pMD-18T载体,转化至大肠埃希氏菌NovaBlue后测序分析,结果表明,克隆到1176bp的p53 cDNA,共编码391个氨基酸。序列分析表明,p53 cDNA序列与GenBank中的旋毛虫p53基因序列相比共有12个核苷酸发生改变,二者的同源性为98%,所编码蛋白质氨基酸序列的同源性为98%。将其克隆到原核表达载体pET28a并转化至表达菌BL21star(DE3),经IPTG诱导表达后获得约48000的重组蛋白。Western blotting检测证实,p53重组蛋白可以被旋毛虫感染猪血清识别,具有很好的抗原性。

分类号: S852.7

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