猪TLR3胞外区片段重组载体的构建、表达和多克隆抗体的制备

文献类型： 中文期刊

第一作者： 管齐赛

作者： 管齐赛;房永祥;贾怀杰;何小兵;周涛;杨孝朴;景志忠

作者机构：

关键词： 猪TLR3;胞外区;原核表达;多克隆抗体

期刊名称： 甘肃农业大学学报

ISSN： 1003-4315

年卷期： 2012 年 47 卷 03 期

页码： 1-6+12

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为制备猪TLR3(poTLR3)胞外区蛋白的多克隆抗体,从poTLR3克隆载体扩增胞外区基因序列连接到pGEX-4T-1载体上,转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG的诱导下,表达GST-poTLR3融合蛋白,将表达的融合蛋白纯化,免疫家兔制备抗体,并以间接ELISA法测定抗体效价,利用Western-blot和细胞免疫荧光验证抗体与真核表达蛋结合的白特异性.结果表明:制备的多克隆抗体的效价可达1∶128 000,poTLR3胞外区蛋白在大肠杆菌中得到高效表达,并且制备的多克隆抗体特异性好、滴度高.

分类号： S828`S852.43

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