Ⅰ型猫疱疹病毒gB蛋白的截短表达及多克隆抗体的制备

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李娜

作者： 李娜;王真真;杜汉宇;贾楠楠;宋若楠;朱杰;李传峰;程松;梁留存;刘光清;孟春春

作者机构：

关键词： Ⅰ型猫疱疹病毒（FHV-1）;原核表达;gB截短重组蛋白;多克隆抗体

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2022 年 012 期

页码： 1531-1537

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为获得免疫原性好的Ⅰ型猫疱疹病毒（FHV-1）gB截短蛋白和制备特异性的多克隆抗体，以用于检测gB蛋白的表达水平变化及FHV-1的血清学诊断技术研究，本试验截取gB蛋白的优势抗原区并插入pET-30a载体，构建原核表达质粒pET-30a-gB，测序正确后转入BL21（DE3）感受态细胞进行诱导表达。通过亲和层析纯化蛋白，将获得的重组蛋白免疫6周龄雌性新西兰大白兔制备多克隆抗体。采用固定病毒-稀释血清法测定多抗中和效价，使用FHV-1感染后的细胞样本进行间接免疫荧光和West-blotting检测其反应性和特异性。结果显示，成功构建了表达FHV-1截短gB蛋白的重组质粒pET-30a-gB，在37℃诱导8 h后主要以包涵体形式表达。中和试验结果显示，制备FHV-1 gB截短蛋白多克隆抗体中和效价为1∶48。间接免疫荧光和West-blotting试验结果表明，所制备多克隆抗体具有良好的反应性和特异性，可特异性检测出FHV-1感染细胞中的gB蛋白。结果表明，原核表达的gB截短重组蛋白具有良好的免疫原性，制备的多克隆抗体具有较高的中和效价以及较好的反应性和特异性，为进一步解析gB蛋白的生物学功能和建立FHV-1血清学诊断方法提供了生物材料保障。

分类号： S852.65

  • 相关文献

[1]Carboxin抗性基因(Cbx~R)原核表达及多克隆抗体的制备. 李小宇,张正坤,王秋华,张春雨,张淋淋. 2015

[2]猪CD40L基因的原核表达及特异性多克隆抗体制备. 薛刚,祝长青,郑其升,张雪花,李倬,侯继波. 2011

[3]延边白鹅IFN-α基因的原核表达及其表达产物生物学活性的研究. 彭永刚,陈海迪,高旭,张颖,鲁承. 2014

[4]绵羊肌肉抑制素C-端的表达、纯化及多克隆抗体的制备. 马毅,舒建洪,李晴,关宏,安晓荣,陈永福. 2009

[5]新型鸭呼肠孤病毒σC蛋白的原核表达及其多克隆抗体制备. 毕庄莉,朱英奇,陈宗艳,李传峰,孟春春,王桂军,刘光清. 2014

[6]Asial型口蹄疫病毒分离株P1基因的原核表达及其多克隆抗体的制备. 张中旺,张永光,王永录,潘丽,张昱. 2009

[7]小麦热激蛋白WHSP90基因的原核表达及多克隆抗体制备. 李琳,徐兆师,刘丽,于卓,李连城,陈明,马有志. 2009

[8]鼠伤寒沙门氏菌鞭毛蛋白FliC的原核表达、纯化及其多克隆抗体的制备. 陈明,徐幸莲,周光宏,汤晓艳,袁飞,陈爱亮. 2013

[9]桑树几丁质酶基因Machi1的克隆及原核表达. 肖圣燕,朱峰,冉瑞法,李镇刚,张永红,邵榆岚,唐芬芬,白兴荣. 2019

[10]西藏株小反刍兽疫病毒H蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备. 于瑞嵩,高位相,李凤平,董世娟,李震. 2018

[11]利用hAPOA1原核蛋白生产兔多克隆抗体. 徐志伟,赵杰,刘伟忠,刘照亭,王期. 2016

[12]猪NLRP3蛋白的原核表达与多克隆抗体制备. 张艳,王文秀,刘海隆,曹宗喜,谭树义. 2019

[13]一个植物半胱氨酸蛋白酶多克隆抗体的制备及其应用. 彭琪琪,羊健,廖乾生,张恒木. 2018

[14]灰飞虱内生病毒HiPV外壳蛋白VP1多克隆抗体的制备及在病毒检测中的应用. 朴君,许春玲,朴敬爱,周益军,李硕. 2019

[15]猪源Viperin基因的克隆、原核表达以及抗体的制备. 方剑玉,朱文豪,李海利,郭小参,白献晓,王克领. 2018

[16]琥珀蚕丝腺转录因子基因AaSGF-1的克隆、原核表达及组织表达分析. 李琼艳,陈安利,荀利杰,刘增虎,廖鹏飞,杨伟克,董占鹏. 2021

[17]口蹄疫病毒3B蛋白的表达纯化及其多克隆抗体的制备. 辛旭,吴香菊,齐静,王永志,李相安,杜正国,单虎,杜以军. 2021

[18]山羊地方性鼻内肿瘤病毒SU蛋白的表达及其多克隆抗体的制备和特性分析. 江锦秀,张靖鹏,林裕胜,游伟,胡奇林. 2021

[19]鸭寡腺苷酸合成酶样蛋白原核表达及多克隆抗体制备. 毕可然,李银,韩凯凯,赵冬敏,刘青涛,刘宇卓,黄欣梅,杨婧. 2019

[20]二点委夜蛾非典型嗅觉受体AlepOrco的基因克隆、原核表达及多克隆抗体制备. 田彩红,刘晓光,黄建荣,王瑛,封洪强. 2020

作者其他论文 更多>>

微信小程序