三疣梭子蟹几丁质酶基因(PtCht6)的克隆及其在免疫中的功能分析
文献类型: 中文期刊
第一作者: 宋柳
作者: 宋柳;吕建建;王磊;孙东方;刘萍
作者机构:
关键词: 三疣梭子蟹;几丁质酶;白斑综合征病毒(WSSV);副溶血弧菌;低盐胁迫
期刊名称: 海洋与湖沼
ISSN: 0029-814X
年卷期: 2019 年 005 期
页码: 1080-1090
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 几丁质酶(chitinase)在甲壳动物的蜕皮、消化和免疫等很多生物学过程中发挥重要功能,为深入探讨几丁质酶的免疫防御机制,本实验利用RACE技术克隆了三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)PtCht6基因.该基因cDNA全长2736bp,开放阅读框(ORF)2103bp,编码700个氨基酸,具有几丁质酶GH18家族典型特征.利用实时荧光定量技术分析PtCht6在三疣梭子蟹不同组织、不同蜕皮阶段、不同病原感染以及低盐胁迫(11)下的表达特征,结果显示:PtCht6在各组织中均有表达且在肝胰腺中的表达量最高;在不同蜕皮时期的肝胰腺中,其表达量由蜕皮后期(A/B)、蜕皮间期(C)、蜕皮前期(D)依次递减(P<0.05);人工感染WSSV和副溶血弧菌后.PtCht6的表达量在肝胰腺中分别于12h、72h达到最大值,在血细胞中均于12h达到最大值,且相较于对照组,整体显著上调表达(P<0.05);低盐胁迫能够显著抑制该基因的表达,最高抑制73倍(P<0.05).同时发现,低盐环境下感染WSSV后,该基因达到峰值的时间明显延迟(至少延迟12h.P<0.05).该研究结果预示PtCht6作为免疫因子参与三疣梭子蟹的病原防御,且低盐胁迫在一定程度上抑制了该基因的免疫功能.
分类号: S917.4
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