利用正交设计优化烟草SRAP反应体系

文献类型： 中文期刊

第一作者： 陈万胜

作者： 陈万胜;王元英;罗成刚;杨爱国;蒋彩虹;范静苑

作者机构：

关键词： 烟草;SRAP;正交设计;优化

期刊名称： 分子植物育种

ISSN： 1672-416X

年卷期： 2008 年 6 卷 01 期

页码： 177-182

收录情况： CSCD

摘要： 利用正交设计L16(45)对烟草SRAP-PCR反应体系的五因素(Taq酶,Mg2+,模板DNA,dNTP,引物)在四个水平上进行优化试验,PCR结果用统计软件SPSSV13.0分析,得出如下结论:各因素的不同水平对PCR反应结果都有显著的影响,其中Taq酶量影响最大;筛选出各反应因素的最佳水平,建立烟草SRAP-PCR反应的最佳体系(25μL)为:Taq酶1.0U,Mg2+1.5mmol/L,模板DNA30.00￣120.00ng,dNTP0.1mmol/L,引物0.40μmol/L。最后,应用烟草SRAP-PCR最佳反应体系对PCR扩增程序中的退火温度及循环次数进行了筛选,得出SRAP-PCR扩增以52℃退火温度、35个循环次数为最佳。这一优化系统的建立为今后利用SRAP标记技术对烟草进行基础研究提供了一个标准化的程序。

分类号： S572`Q943.2

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