抗口蹄疫病毒分泌型IgA抗体的构建表达及特性分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 刘锋

作者： 刘锋;李坤;马雪青;欧阳一凡;孙普;章兴赜;曹轶梅;白兴文;袁红;李凤娟;刘在新;卢曾军;李平花

作者机构：

关键词： 口蹄疫病毒;分泌型IgA抗体;构建表达;特性研究

期刊名称： 微生物学报

ISSN： 0001-6209

年卷期： 2025 年 65 卷 009 期

页码： 3992-4000

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： [目的]制备抗口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)分泌型IgA(secretory IgA,sIgA)抗体,为口蹄疫(foot-and-mouth disease,FMD)的综合防控提供新思路和前期基础.[方法]以实验室前期筛选的一株抗O型和A型FMDV的IgG型中和抗体POA-8 为模板,用猪IgA重链的恒定区基因(经密码子优化)替换IgG重链的相应区域,构建抗FMDV IgA抗体的重链真核表达质粒;同时分别构建含猪源J链和分泌片(secretory component,SC)的真核表达质粒,以及同时含IgA抗体的重链、轻链和J链基因的真核表达质粒.采用 4 质粒(重、轻、J和SC)或 2 质粒(重+轻+J和SC)分别瞬时共转染CHO-S悬浮细胞,进行抗FMDV sIgA抗体的组装表达.表达的sIgA抗体经纯化后,通过SDS-PAGE和Western blotting进行鉴定,并利用间接ELISA和微量病毒中和实验评价sIgA抗体与FMDV的结合活性和中和活性.[结果]4 质粒或 2 质粒共转染CHO-S细胞后均能成功组装表达抗FMDV的sIgA抗体,且sIgA抗体对O型和A型FMDV的结合能力及中和能力均强于 IgG 抗体.[结论]本研究成功构建了抗 FMDV sIgA 抗体的表达系统,为未来FMD黏膜疫苗和抗病毒药物的开发奠定了基础.

分类号： S852.65

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