马-干扰素成熟蛋白基因在大肠埃希氏菌中表达及其单克隆抗体的制备和特性鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 白宇

作者： 白宇;童铁钢;刘光亮;肖一红;王群;徐树兰;张维军;吴东来

作者机构：

关键词： 成熟蛋白基因;单克隆抗体;抗原表位;特性鉴定;表达产物;大肠埃希氏菌;原核表达;间接免疫荧光;阅读框;IgG

期刊名称： 第七届全国病毒学学术研讨会暨第二届武汉现代病毒学国际研讨会论文集

ISSN：

年卷期： 2007 年

页码： 1

收录情况： CSCD

摘要： 采用RT-PCR从马外周血单核细胞(PBMC)中扩增获得马伽玛干扰素(Equineinterferon-,EIFN-)基因,去除信号肽序列后得到马干扰素成熟蛋白(matureEIFN-,mEIFN-)基因,克隆到pET-28a(+)载体进行原核表达。对表达的成熟蛋白产物进行SDS-PAGE分析和Western-blot鉴定。利用表达的成熟蛋白免疫BALB/c小鼠制备单克隆抗体,间接ELISA筛选及间接免疫荧光(IFA)进行鉴定,同时利用分段表达的马-干扰素对单抗进行表位鉴定。结果表明,mEIFN-基因全长为441bp,含一个开放阅读框,编码146个氨基酸;其表达...

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