鸡γ-干扰素实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王群

作者： 王群;刘光亮;童铁钢;肖一红;吴东来

作者机构：

关键词： 鸡γ-干扰素;实时荧光定量RT-PCR;检测方法

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2007 年 37 卷 07 期

页码： 631-635

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为建立一种检测鸡γ-干扰素的实时荧光定量RT-PCR方法,采用RT-PCR方法从ConA诱导活化的鸡脾淋巴细胞的总RNA中扩增得到鸡γ-干扰素(ChIFN-γ)和鸡的28 SrRNA(Ch28 S)基因,将其分别克隆至体外转录载体后经体外转录获得了ChIFN-γ和Ch28 S的RNA,采用各自的特异性引物及Taqman探针,以Ch28 S RNA作为内参进行一步法实时荧光定量RT-PCR,检测ChIFN-γ。结果表明:ChIFN-γ和内参Ch28 S的Ct值与标准品稀释梯度在1×102~1×107拷贝/μL范围分别呈良好的线性关系,r2均大于0.99。此方法用于检测ChIFN-γ,具有简便、高效、敏感、特异的特点。

分类号： S852.4

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