镰形扇头蜱唾液腺cDNA文库的构建

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张维谊

作者： 张维谊;周金林;龚海燕;周勇志;黄维义

作者机构：

关键词： 镰形扇头蜱;唾液腺;cDNA文库;细胞色素氧化酶

期刊名称： 中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 2004 年 24 卷 05 期

页码： 445-447

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 构建了镰形扇头蜱唾液腺 c DNA表达文库。用 Trizol试剂提取镰形扇头蜱唾液腺总 RNA,经反转录合成 c DNA第 1链 ,应用 L D- PCR扩增方法 ,合成双链 c DNA。用 Sfi 内切酶修饰此双链 c DNA,使形成两端分别带有 Sfi A和Sfi B的粘末端。经 CHROMA SPIN- 4 0 0柱纯化 ,收集 4 0 0 bp以上的双链 c DNA片段 ,将其连接于带有 Sfi A和 Sfi B末端的λ Tripl Ex2噬菌体载体 ,经体外包装后 ,以 XL1 - Blue为受体菌构建 c DNA表达文库。经测定 ,库容量为7.0 8× 1 0 5,重组率为 95 .2 %。扩增后的文库滴度为 1 .4 5× 1 0 9pfu/ m L。随机挑取 2 0个克隆转化到质粒 p Tripl Ex2 ,经抽质粒、测序得到 2个细胞色素氧化酶全长基因

分类号： S852.7

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