柔嫩艾美耳球虫表面抗原(EtSAG)基因的分离及鉴定

文献类型: 中文期刊

第一作者: 马卫娇

作者: 马卫娇;韩红玉;姜连连;董辉;赵其平;朱顺海;程军;曾艳波;黄兵

作者机构:

关键词: 柔嫩艾美耳球虫;表面抗原;克隆表达;抗原性分析

期刊名称: 中国动物传染病学报

ISSN: 1674-6422

年卷期: 2010 年 18 卷 06 期

页码: 43-48

摘要: 利用本实验室前期获得的柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)孢子化卵囊和未孢子化卵囊差异表达ESTs序列,选取编号为BW4-C03的孢子化卵囊,采用RACE技术,获得该基因全长序列。经BLAST分析,该序列与柔嫩艾美耳球虫表面抗原有72%以上的同源性,命名为EtSAG。利用荧光定量PCR(Real-time PCR)检测发现该基因在孢子化卵囊的转录拷贝数最高,且随着孢子化时间的延长,转录拷贝数逐渐增加。采用原核表达载体pET-28C表达该基因,得到的融合蛋白大小约为36 kDa,符合预期大小。经Western blot分析,该重组蛋白可被兔抗柔嫩艾美耳球虫的多克隆抗血清识别,表明该蛋白具有较好的反应原性。本研究结果为进一步研究该基因的生物学功能奠定了基础。

分类号: S852.723

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