小麦γ-醇溶蛋白1基因克隆及其互作蛋白筛选

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王沙沙

作者： 王沙沙;何宁;黄超;王刚;汪庆昌;晁岳恩

作者机构：

关键词： 小麦;γ-醇溶蛋白1;酵母双杂交;互作蛋白;回转验证

期刊名称： 河南农业科学

ISSN： 1004-3268

年卷期： 2024 年 53 卷 011 期

页码： 27-33

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为进一步研究γ-醇溶蛋白1基因调控小麦面粉品质的分子机制，以郑麦158（低蛋白质含量、高面团强度）为研究材料，克隆小麦γ-醇溶蛋白1基因，构建诱饵载体pGBKT7-γ-醇溶蛋白1，利用酵母双杂交技术从郑麦158的cDNA文库中筛选γ-醇溶蛋白1的候选互作蛋白，并通过回转验证试验进一步验证其互作关系。结果表明，成功克隆了γ-醇溶蛋白1基因，其cDNA全长为1 020 bp。利用酵母双杂交技术共筛选到117个蓝色单克隆菌落，经菌液PCR检测、测序以及NCBI的BLAST比对分析，共获得10个与γ-醇溶蛋白1互作的候选蛋白，它们分别是富含半胱氨酸和跨膜结构域蛋白1(XM＿044546254.1)、α-淀粉酶抑制剂（XM＿044509330.1）、特异性内切-1,3:1,4-β-D-葡聚糖酶2(XM＿044550285.1、XM＿044594213.1)、蔗糖果糖基转移酶（XM＿044554537.1）、支链淀粉酶1(XM＿044577151.1)和半胱氨酸蛋白酶B-like(XM＿044577994.1)，还有与植物生殖生长尤其是果实或者籽粒生长有关的细胞数目调控因子CNR8-like(XM＿044483337.1、XM＿044491902.1)、CNR2-like(XM＿044468782.1)以及参与蛋白质修饰的泛素结构域蛋白DSK2b-like(Dominant suppressor of KAR 2b like,XM＿044546840.1)和CIP73(CCa MK-interacting protein of 73 ku,XM＿044554473.1)。候选互作蛋白的回转验证试验结果表明，富含半胱氨酸和跨膜结构域蛋白1、α-淀粉酶抑制剂、特异性内切-1,3:1,4-β-D-葡聚糖酶2和半胱氨酸蛋白酶B-like等4个蛋白质可能与γ-醇溶蛋白1存在互作关系。推测γ-醇溶蛋白1可能与这些蛋白质相互作用参与小麦种子中贮藏蛋白（如半胱氨酸）和淀粉的合成与降解等过程。

分类号： S512.1

  • 相关文献

[1]小麦硝酸盐转运蛋白TaNRT1.1-1A转录活性检测及互作蛋白筛选. 宋晓,黄绍敏,张珂珂,王沙沙,李向东,杨程,杨天军. 2023

[2]基于酵母双杂交系统筛选灰飞虱体内与大麦黄条点花叶病毒核衣壳蛋白互作的蛋白质. 刘文文,刘艳,王锡锋. 2019

[3]应用酵母双杂交系统筛选虾夷扇贝FOXL2的相互作用蛋白. 张阳,张玲玲,李若佼,谢欣冉,李仰平,李婉茹,包振民. 2019

[4]利用酵母双杂交系统筛选花生AhMYB44互作蛋白. 刘永惠,沈一,沈悦,陈志德. 2020

[5]传染性法氏囊病病毒VPP5酵母双杂交诱饵载体的构建及互作宿主细胞蛋白的筛选. 王念,张礼洲,陈玉明,卢珍,高立,高玉龙,王永强,高宏雷,刘长军,崔红玉,李凯,王笑梅,祁小乐. 2015

[6]真菌蛋白激发子PevD1互作蛋白的酵母双杂交筛选及融合蛋白的原核表达. 伍文宪,韩磊,杨秀芬. 2014

[7]巴西橡胶树HbHMGR1在开割前后胶乳中的互作蛋白筛选. 晁金泉,赵一杰,吴绍华,杨署光,田维敏. 2021

[8]青枯菌诱导的桑树根部酵母双杂交文库构建和MaTGA1互作蛋白的筛选及鉴定. 戴凡炜,王振江,罗国庆,钟建武,李智毅,唐翠明. 2023

[9]大丽轮枝菌及激素处理后棉花酵母双杂交文库的构建. 许艳,李冉,宋健,王丹,周雷,李俊娇,张丹丹,陈捷胤,戴小枫,杨星勇. 2021

[10]大豆类钙调磷酸酶B亚基GmCBL1互作候选蛋白的筛选. 李林蔚,张双喜,周永斌,裴丽丽,陈明,李连城,马有志,刘生祥,徐兆师. 2015

[11]蛋白激发子Hrip1互作蛋白的筛选及其原核表达. 杨秀芬,袁京京,邱德文. 2017

[12]蛋白激发子Hrip1结构解析及其互作蛋白的研究. 邱德文,张蕾,黄小琴,刘勇. 2014

[13]木薯MeAHL19的互作蛋白筛选及鉴定. 张建禹,王晓彤,耿沙,毋志浩,任思杨,李瑞梅,姚远,郭建春,刘姣,胡新文. 2022

[14]传染性法氏囊病病毒VP4酵母双杂交诱饵载体的构建及互作宿主细胞蛋白的筛选. 王念,陈玉明,张礼洲,高立,卢珍,高玉龙,王永强,高宏雷,刘长军,崔红玉,王笑梅,祁小乐. 2015

[15]白菜种子cDNA酵母文库的构建及BrTTG1互作蛋白的筛选及分析. 任延靖,张鲁刚,赵孟良,李江,邵登魁. 2024

[16]木薯MeSAUR1互作蛋白的筛选及鉴定. 郑婉茹,丁凯旋,陆小花,王睿,陈银华,姚远,陈新,耿梦婷. 2023

[17]鲤疱疹病毒Ⅱ型ORF25B编码蛋白诱饵载体的构建及其互作蛋白的筛选. 聂细荣,薛明洋,林格,李逸群,范玉顶,刘文枝,孟彦,江南,曾令兵,周勇. 2021

[18]小麦TaDREB6转录因子互作蛋白的筛选. 孙海桃,徐兆师,侯建华,于卓,赵月,李连城,陈明,马有志. 2011

[19]非生物胁迫诱导的棉花酵母双杂交文库构建及GhJAZ1互作蛋白筛选. 蔡肖,李兴河,王海涛,刘存敬,唐丽媛,张素君,张建宏. 2023

[20]水稻酵母双杂交文库构建及PID2胞内结构域互作蛋白的筛选. 孙一丁,杨奕,刘畅媛,马继琼,许明辉. 2022

作者其他论文 更多>>

微信小程序