利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统在家蚕中表达人瘦素蛋白

文献类型： 中文期刊

第一作者： 陈蔚

作者： 陈蔚;付凡;唐顺明;汪生鹏;黄金山;赵巧玲;沈兴家

作者机构：

关键词： 人瘦素蛋白;Bac-to-Bac杆状病毒表达系统;重组杆状病毒;融合蛋白;家蚕

期刊名称： 蚕业科学

ISSN： 0257-4799

年卷期： 2011 年 37 卷 02 期

页码： 150-154

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 瘦素(leptin)蛋白由肥胖基因编码,对人体能量代谢等多种生理过程起着重要的调节作用。利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统,将人瘦素蛋白基因(lep)克隆到杆状病毒转移载体pFastBacHTb,并转化E.coli DH10Bac,获得重组杆粒Bacmid-lep,然后转染家蚕BmN细胞,获得重组杆状病毒。用SDS-PAGE和Western blotting方法在感染重组病毒的家蚕BmN细胞检测到大小约22 kD的蛋白条带,与预期的人瘦素蛋白分子质量相符。给家蚕5龄起蚕注射重组病毒液后的4～5 d出现发病症状,RT-PCR检测发病家蚕的血液中有lep基因转录,并通过SDS-PAGE和Western blotting检测到大小为22 kD的人瘦素蛋白的表达。研究结果表明,利用Bac-to-Bac表达系统能够获得含有人瘦素蛋白基因的重组杆状病毒,并且目的蛋白能在家蚕细胞及幼虫体内表达。

分类号： S881.2

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