犬瘟热病毒RT-nested PCR检测方法的建立与应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王凤雪

作者： 王凤雪;闫喜军;柴秀丽;罗国良;张海玲;邵西群;吴威;程世鹏

作者机构：

关键词： 犬瘟热病毒;反转录巢式PCR;反转录PCR;NP基因

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2007 年 37 卷 11 期

页码： 955-959

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据犬瘟热病毒(CDV)弱毒株Onderstepoort的核衣壳蛋白(NP)基因序列设计了套式引物,建立了RT-nested PCR检测方法。特异性试验表明,该法可以特异扩增出CDV NP基因片段,但从RNA病毒狂犬病病毒(RV)、犬副流感病毒(CPIV)、犬冠状病毒(CCV),DNA病毒犬细小病毒(CPV)、犬腺病毒(CAV)及正常Vero细胞中均不能扩增出条带。敏感性试验表明,RT-PCR可以扩增10-6稀释度的病毒RNA,而建立的RT-nested PCR可以扩增到10-9稀释度的病毒RNA,后者的敏感性明显高于前者。用RT-nested PCR法检测了2006年我国东北地区临床表现犬瘟热症状的病例19例,检出率达90%,明显高于RT-PCR的检出率(45%)。部分病例扩增片段的测序结果表明,CDV NP基因出现个别碱基变异。研究结果表明,建立的犬瘟热病毒RT-nested PCR方法敏感、特异,适用于动物犬瘟热的快速诊断。

分类号： S854.43

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