猫杯状病毒VP1蛋白B细胞表位的串联表达及间接ELISA方法的建立
文献类型: 中文期刊
第一作者: 王真真
作者: 王真真;汤傲星;刘春草;李娜;林亮亮;宋若楠;贾楠楠;杜汉宇;朱杰;李传峰;刘光清;孟春春
作者机构:
关键词: 猫杯状病毒;VP1蛋白;串联的B细胞表位;间接ELISA
期刊名称: 中国动物传染病学报
ISSN: 1674-6422
年卷期: 2025 年 33 卷 003 期
页码: 103-109
摘要: 为建立一种检测猫杯状病毒抗体的间接ELISA方法,本试验将截短的猫杯状病毒VP1蛋白表达为重组蛋白纯化后作为包被抗原。采用棋盘式方法优化反应的最佳血清稀释度和抗原包被量,同时对间接ELISA方法的其他反应条件进行了比较。结果显示,抗原包被量为2 μg/mL,血清最佳稀释度为1∶1000,37 ℃作用1 h;二抗的最佳工作浓度为1∶10 000;TMB底物显色液37 ℃避光显色反应15 min。特异性试验结果显示,同FPV和FHV阳性血清均无交叉反应。此方法对猫细小病毒阳性血清的敏感性为1∶40 960;组内、组间变异系数均小于5%。与本实验室建立的包被全病毒的方法平行比较,显示其检测阴阳性血清的值高度一致。结果表明,建立的基于截短的猫杯状病毒VP1蛋白建立的间接ELISA方法非常适用于临床样本的检测,可为猫杯状病毒的防控工作提供技术支撑。
分类号: S852.65
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