猪戊型肝炎病毒ORF2 C-端主要抗原区的克隆及原核表达
文献类型: 中文期刊
第一作者: 杨标
作者: 杨标;易咏竹;张志芳;柳纪省;吴润
作者机构:
关键词: 戊型肝炎病毒;ORF2;原核表达;质谱分析;抗原性
期刊名称: 中国兽医科学
ISSN: 1673-4696
年卷期: 2012 年 03 期
页码: 280-284
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 为研究猪戊型肝炎病毒(HEV)ORF2C-端主要抗原区的原核表达产物是否具有抗原性,用PCR技术对猪戊型肝炎病毒ORF2C-端基因进行扩增,经克隆与序列分析,发现该基因片段编码289个氨基酸残基。将该目的片段连接到原核表达载体pET-28a(+)中,转化表达菌BL21(DE3),成功构建了重组质粒pET-HEV-ORF2-C,其重组菌于37℃、0.5mmol/L IPTG诱导表达4h后,菌体裂解物经SDS-PAGE分析,在分子质量约为34ku处出现一新蛋白带,与预期的目的蛋白分子质量相符。质谱鉴定表明,成功地表达了HEV-ORF2C-端蛋白。Western-blot和抗体效价检测分析结果表明该重组蛋白具有良好的抗原性。
分类号: S852.659.6
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