肝片吸虫CatL1D蛋白的免疫原性研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王熙凤

作者： 王熙凤;孟庆玲;乔军;陈英;钟文强;贡莎莎;黄运福;才学鹏

作者机构：

关键词： 肝片吸虫;组织蛋白酶L1D;分子特征;免疫原性

期刊名称： 西北农林科技大学学报(自然科学版)

ISSN： 1671-9387

年卷期： 2019 年 05 期

页码： 1-6

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】研究绵羊肝片吸虫(Fasciola hepatica,Fh)CatL1D蛋白的分子特征和免疫原性。【方法】利用RT-PCR技术扩增出CatL1D基因,用相关软件分析其编码蛋白的生物学信息。将CatL1D基因克隆入表达载体pET-32a(+)中,构建原核表达载体pET-CatL1D,进行BamHⅠ/XhoⅠ双酶切和测序鉴定。将pET-CatL1D载体转化入大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE和Western blot分析;以纯化后的重组蛋白CatL1D为抗原免疫小鼠,利用间接ELISA方法检测抗体效价,分析其免疫原性。【结果】成功克隆了CatL1D基因,该基因全长981 bp,编码326个氨基酸,其中第21-79位氨基酸为组织蛋白酶前肽抑制剂结构域,第108-321位氨基酸为木瓜蛋白酶家族半胱氨酸蛋白酶保守结构域;CatL1D蛋白含有6个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点、11个豆蔻酰化位点、1个蛋白激酶C磷酸化位点,含有10个优势抗原表位。成功构建了pET-CatL1D原核表达载体,诱导表达出CatL1D重组蛋白;SDS-PAGE和Western blot分析表明,重组蛋白CatL1D分子质量为51 ku,以包涵体的形式表达,具有较强的反应原性。间接ELISA法检测结果表明,重组蛋白CatL1D免疫小鼠血清抗体效价可达1∶102 400,证实其具有良好的免疫原性。【结论】Fh重组蛋白CatL1D具有较强的抗原性,有开发为早期诊断抗原和亚单位疫苗的潜力。

分类号： S852.735

  • 相关文献

[1]肝片吸虫天冬酰胺内肽酶的分子特征、遗传进化及抗原特性研究. 张国武,孟庆玲,乔军,王熙凤,张凯,宁程程,季春辉,才学鹏. 2021

[2]肝片吸虫Ftn-1蛋白分子特征、抗原性及其抗体制备. 王熙凤,孟庆玲,乔军,陈英,钟文强,贡莎莎,黄运福,才学鹏. 2018

[3]肝片吸虫CatB9蛋白的分子特征、遗传进化及表达定位研究. 张凯,王熙凤,孟庆玲,乔军,张国武,宁程程,李娜,才学鹏. 2023

[4]肝片吸虫CatB4蛋白分子特征及其免疫原性分析. 王熙凤,孟庆玲,乔军,张凯,张国武,贡莎莎,黄运福,才学鹏. 2019

[5]肝片吸虫GST真核表达载体构建及重组蛋白活性分析. 冉旭华,闻晓波,王春仁,刘娣,孙中武,李晓娟,王密. 2011

[6]2017年关岭牛肝片吸虫虫卵检查及感染情况统计. 韦登雄,冯明祥,徐雨,吴位珩,刘苹,陈永翠,杨和俊,陈颖. 2019

[7]西藏曲水某水产养殖场螺内吸虫蚴虫的形态观察及PCR鉴定. 周磊,李云灿,参木有,罗布次仁,李家奎. 2019

[8]抗肝片吸虫新药——三氯苯咪唑的研究进展. 柴忠威,才学鹏. 1999

[9]绵羊肝片吸虫谷胱甘肽硫转移酶基因的克隆与序列分析. 冉旭华,闻晓波,王春仁,刘娣,孙中武,李晓娟,王密. 2012

[10]肝片吸虫检测方法概述. 周愉乐,唐文强,赵霞玲,甘富斌,切德力,石斌,李鑫,秋益多杰,吉布,黄福强. 2024

[11]国产克洛素隆驱除山羊肝片吸虫的临床试验. 胡振英,罗超应,尚若峰,李树荣,郑继方,梁纪兰,罗永江,张新国,史彦斌,崔颖,马乃祥,李军. 2004

[12]肝片吸虫SAP-2蛋白的基因克隆、表达及其诊断潜力初步评估. 王熙凤,乔军,孟庆玲,陈英,钟文强,贡莎莎,黄运福,才学鹏. 2018

[13]感染两种蠕虫病的山羊血液生理生化指标比较. 江斌,林琳,吴胜会,张世忠,林甦,蔡羲. 2017

[14]20％氯苯咪唑对绵羊肝片吸虫驱除试验. 库尔班·居玛,张劲松,张壮志,石保新,张文宝,王进成,康强,艾尔肯,巴拉提,外力. 2008

[15]第二讲应用气象资料进行动物寄生虫数量和寄生虫病预测预报. 沈杰. 2003

[16]三氯苯咪唑驱除绵羊肝片吸虫的疗效试验. 王进成,艾尔肯,康强,巴拉提,艾买江,张壮志. 2003

[17]牛羊四种寄生虫病联合诊治技术的研究与应用. 张雪娟,孙仁寅,刘恩勇,毛光琼,冯尚连,朱家新,阳爱国,宋灿明,彭又新. 2000

[18]肝片吸虫Fh8明显增强STEC的Stx1可溶性表达及Stx1单克隆抗体制备. 张雪寒,张碧成,张强,汪伟,何孔旺. 2016

[19]20%三氯苯咪唑对绵羊肝片吸虫驱除试验. 库尔班·居玛,张劲松,张壮志,石保新,张文宝,王进成,康强,艾尔肯,巴拉提,外力. 2008

[20]片形吸虫分泌排泄抗原和虫体抗原的分析. 沈涛,何国声,沈永林,顾越星,徐梅倩. 2001

作者其他论文 更多>>

微信小程序