重组毛囊特异性表达载体的构建与验证

文献类型： 中文期刊

第一作者： 于永生

作者： 于永生;罗晓彤;朴庆林;金海国

作者机构：

关键词： 角蛋白关联蛋白6-1;毛囊特异表达载体;体外验证

期刊名称： 安徽农业科学

ISSN： 0517-6611

年卷期： 2011 年 39 卷 06 期

页码： 3615-3617

收录情况： 北大核心

摘要： [目的]构建毛囊特异性表达绵羊毛角蛋白Ⅱ型中间丝9(KIF Ⅱ-9)cDNA的毛囊特异性表达载体,并证明其表达的有效性。[方法]根据绵羊毛角蛋白关联蛋白6-1(KAP6-1)基因已知DNA序列设计合成2个特异性引物,以绵羊基因组DNA为模板,通过PCR扩增得到KAP6-15’调控序列,然后与毛角蛋白Ⅱ型中间丝基因(KIFII-9)cDNA、去除CMV启动子的表达载体pcDNA3.1连接构成皮肤特异性表达载体pcDNA3.1-KK,新生小鼠皮下注射该重组载体证明其表达有效性。[结果]PCR扩增出1042 bp的特异性片段,DNA测序结果证明,该克隆片段与KAP6-1 5’端调控区序列相比具有极高的一致性;构建的毛囊特异性表达载体PCDNA3.1-KK,皮下注射新生小鼠,皮肤内KIF Ⅱ-9得到转录。[结论]该试验构建的载体PCDNA3.1-KK具有表达特异性。

分类号： S827

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