鸭源H7N9亚型流感病毒HA蛋白的真核表达及其免疫保护效力分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 周陈陈

作者： 周陈陈;梁立滨;赵青青;黄山雨;李奇兵;王广文;李俊平;赵玉辉;曾显营;施建忠;李呈军;陈化兰;姜丽

作者机构：

关键词： H7N9;HA蛋白;杆状病毒表达;免疫保护

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2019 年 01 期

页码： 58-62

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为进行鸭源H7N9亚型流感病毒HA蛋白表达纯化及其免疫保护效力分析,本研究以鸭源流感病毒A/Duck/Fujian/S4170/2014 (H7N9)HA基因为模板,PCR扩增后将HA片段克隆至昆虫细胞表达载体p Fast Bac1中。将构建的重组质粒p FBacH7HA转化DH10Bac感受态细胞,提取PCR鉴定为阳性的重组杆粒Bacmid-H7HA,转染SF9昆虫细胞。结果显示重组Bacmid-H7HA表达HA蛋白,并装配成重组杆状病毒,将该病毒感染High Five细胞,大量表达H7-HA蛋白。免疫荧光试验、SDS-PAGE及western blot分析结果表明H7-HA蛋白正确表达且纯度达90%以上,血凝试验表明表达蛋白具有良好的生物活性。利用纯化的H7-HA蛋白免疫SPF鸡后进行攻毒保护试验,评价该蛋白作为免疫原对SPF鸡的免疫保护效力,结果显示HA蛋白免疫组鸡只得到100%保护。以上结果表明本研究表达纯化的H7-HA蛋白可以作为防控H7亚型禽流感的候选亚单位疫苗。

分类号： S852.65

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