适于SSR-PCR的农作物基因组总DNA高通量提取方法的建立(英文)

文献类型： 中文期刊

第一作者： 梁俊

作者： 张妍;陈忠良;莫璋红;范业赓

作者机构：

关键词： 甘蔗;水稻;玉米;花生;大豆;DNA提取;SSR

期刊名称： 南方农业学报

ISSN： 2095-1191

年卷期： 2012 年 43 卷 11 期

页码： 7-11

收录情况： CSCD

摘要： 【目的】建立一种新的、通用、快速的农作物基因组总DNA提取方法,为应用分子标记技术研究遗传多样性及变异提供方便。【方法】分别从甘蔗、水稻、玉米、花生和大豆5种作物中提取基因组DNA,用琼脂糖凝胶电泳对所提取的DNA质量进行检测,然后每种作物分别选取两对SSR引物进行PCR扩增,用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测扩增结果。【结果】采用该提取方法,不同作物产生的纯DNA在100.0～160.0g/g,提取DNA的A260/A280比率在1.80～1.95。此外,电泳凝胶未出现可见的RNA污染,每个作物基因组DNA单一条带非常清晰,DNA结构完整,质量较高,适用于分子标记的研究。应用SSR分子标记进行PCR扩增,重复性、稳定性好,经琼脂糖凝胶电泳检测,条带清晰且分辨率较高。【结论】建立的DNA提取方法为直接将叶片剪碎后装入EP管中,加入提取缓冲液进行DNA提取,省去了用液氮研磨的过程。与传统的DNA分离方法相比,新建立的DNA提取方法具有高通量、简单、快速、经济效益高等优点。

分类号： S188

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