鼠痘病毒EVM135和EVM085蛋白免疫原性及抗体中和活性的鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 高真贞

作者： 高真贞;蒙泽菁;何小兵;房永祥;田慧慧;陈国华;景志忠

作者机构：

关键词： A33;H3L;原核表达;多克隆抗体;中和活性

期刊名称： 畜牧兽医学报

ISSN：

年卷期： 2023 年 006 期

页码： 2468-2477

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 正痘病毒属病毒的A33和H3L蛋白是其成员共有的中和抗体的两个主要靶标。为检测鼠痘病毒（ectromelia virus, ECTV）A33和H3L蛋白同源物的免疫原性及抗体中和活性，以ECTV-Moscow株基因组DNA为模板，PCR扩增A33和H3L同源基因EVM135、EVM085目的序列，分别构建pET30a-EVM135、pET30-EVM085原核表达载体，转化Rosetta感受态细胞，IPTG诱导表达，利用镍层析柱纯化并进行逐步透析复性，免疫兔制备多克隆抗体。建立间接ELISA方法测定其抗体效价分别达1∶120 000和1∶360 000,Western blot和IFA证实该多克隆抗体具有良好的特异性和反应性；ECTV病毒中和试验表明抗EVM135多克隆抗体中和效价为1∶16,而抗EVM085多克隆抗体效价为1∶128。本研究通过高效表达EVM135和EVM085蛋白，并分析其免疫原性及抗体中和活性，为深入研究痘病毒致病和免疫机理，进而快速建立其诊断方法，为猴痘防控技术措施的研究奠定基础。

分类号： S852.4

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