过表达JMJD6基因的293T细胞系的构建及对水疱性口炎病毒增殖效率的评价

文献类型： 中文期刊

第一作者： 黄梦瑶

作者： 黄梦瑶;杨帆;杨洋;邵文华;王家丽;吕岳芹;赵晓义;陈治彤;曹伟军;张伟;郑海学

作者机构：

关键词： JMJD6;水疱性口炎病毒;慢病毒包装;过表达细胞系;干扰素

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2024 年 54 卷 005 期

页码： 569-576

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为提高水疱性口炎病毒(vesicular stomatitis virus,VSV)在细胞中的增殖效率,本研究利用慢病毒包装系统构建Jumonji C结构域蛋白 6(Jumonji domain-containing protein 6,JMJD6)过表达的HEK-293T/JMJD6 细胞系,分析VSV在HEK-293T/JMJD6 细胞系与HEK-293T细胞中的复制差异.首先以JMJD6 基因为目标,构建重组质粒pLV-puro-3×Flag-JMJD6,并与辅助质粒pMD2.G和psPAX2 共转染至HEK-293T细胞进行慢病毒包装.将包装好的慢病毒感染HEK-293T细胞并通过嘌呤霉素筛选获得过表达JMJD6 基因的阳性细胞.利用Western-blot、间接免疫荧光试验、流式细胞术和蚀斑试验检测VSV在HEK-293T/JMJD6细胞系中的复制能力.结果显示,在HEK-293T/JMJD6 细胞系中,VSV的复制能力显著增强.实时荧光定量检测VSV感染的HEK-293T/JMJD6 细胞系和野生型HEK-293T细胞中干扰素下游基因的表达,结果显示HEK-293T/JMJD6 细胞系抑制VSV诱导的Ⅰ型干扰素下游基因的产生.总之,本研究构建的HEK-293T/JMJD6 细胞系能显著促进VSV的增殖并抑制Ⅰ型干扰素信号通路,为VSV疫苗候选细胞株的筛选奠定了基础.

分类号： S852.659.6

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