文献类型： 中文期刊
第一作者： 李海涛
作者： 何宝楠;赵世源;刘荣梅;张杰;高继国
作者机构：
关键词： 苏云金芽胞杆菌;cry1类基因;克隆;表达;杀虫活性测定
期刊名称： 农业生物技术学报
ISSN： 1674-7968
年卷期： 2015 年 23 卷 11 期
页码： 1445-1451
收录情况： 北大核心
摘要： 本研究基于一株对小菜蛾(Plutella xylostella)幼虫具有高毒力的苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis)菌株FH21,利用改进的限制性片段长度多态性聚合酶链反应(polymerase chain reactionrestriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP),从FH21中成功克隆出杀虫晶体蛋白(insecticidal crystal proteins)基因cry1Bb3、cry1Da4、cry1Ja3和cry1Id3,Gen Bank登录号分别为KJ619659、KJ619660、JQ228425和KJ619661。将上述4个基因插入表达载体p EB,转化大肠杆菌(Escherichia coli)菌株Rosetta(DE3),在低温条件下经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropylβ-D-1-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导表达。FH21总蛋白与4种蛋白的表达产物采用饲喂法分别对小菜蛾、棉铃虫(Helicoverpa armigera)和亚洲玉米螟(Ostrinia furnacalis)进行杀虫活性测定。结果表明,FH21总蛋白对3种昆虫均有较好的杀虫活性,致死中浓度(lethal concentration 50,LC50)分别为0.801、0.502和2.858 mg/L。Cry1Bb3、Cry1Ja3和Cry1Id3蛋白对小菜蛾和亚洲玉米螟有较好的杀虫活性,LC50分别为1.860、1.697、1.538、1.800、2.270和0.840 mg/L。本研究表明,Bt FH21菌株对多种农业害虫具有很高的杀虫活性,同时对其进行杀虫基因测定并对杀虫基因进行了杀虫活性测定,几种cry1类基因的发现为重要农业害虫的防治提供了更多的选择。
分类号： S476.1
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