RNAscope原位杂交技术检测猪繁殖与呼吸综合征病毒RNA方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 崔蒙蒙

作者： 崔蒙蒙;李江南;王刚;何希君;翁长江

作者机构：

关键词： 猪繁殖与呼吸综合征病毒;原位杂交;RNAscope;猪肺泡巨噬细胞;石蜡包埋组织

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2018 年 07 期

页码： 596-600

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了直观、高效、特异性地检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染细胞和组织中PRRSV RNA,本研究根据HP-PRRSV Hu N4株ORF7基因序列设计8对28 bp~36 bp双"Z"结构的寡核苷酸探针(PRRSV-Nprobes),建立了一种新的PRRSV RNA原位杂交检测的方法。该方法能特异性的检测PRRSV感染猪肺泡巨噬细胞(PAMs)中PRRSV RNA,而对猪圆环病毒2型(PCV2)、猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病毒(PRV)感染PAMs中的核酸呈现阴性。应用该方法检测PRRSV感染仔猪肺脏、腹股沟淋巴结和胸腺石蜡包埋组织切片中PRRSV RNA,在感染的腹股沟淋巴结中PRRSV RNA呈现集中分布,而PRRSV RNA在肺脏和胸腺中呈弥漫性分布。该方法可用于细胞和组织中核酸的定位及分布规律的研究,特别是用于病毒含量较少的潜伏感染的检测,为PRRSV实验室检测和致病机理研究奠定了良好的试验基础和技术支持。

分类号： S852.651

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