流产布鲁氏菌BCSP31基因在大肠杆菌中的可溶性高效表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 曹小安

作者： 曹小安;邱昌庆;周继章;蔺国珍

作者机构：

关键词： 流产布鲁氏菌;BCSP31基因;克隆;可溶性表达

期刊名称： 吉林农业大学学报

ISSN： 1000-5684

年卷期： 2007 年 29 卷 06 期

页码： 97-100

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 设计1对引物,突变除去布鲁氏菌BCSP31(细胞表面蛋白31)基因的N端信号肽氨基酸序列,经NotⅠ和EcoRⅠ酶切后与相同处理的表达载体pGEX-4T-1连接,转化BL21(DE3)感受态细胞。酶切及PCR扩增鉴定,获得阳性克隆,测序证明其阅读框完全正确。用IPTG诱导表达构建成功的阳性克隆,对产物进行SDS-PAGE和Western-blotting检测,发现表达产物出现预期分子量57 kD的融合蛋白,该蛋白能与牛流产布鲁氏菌阳性血清发生反应,进一步证明目的蛋白主要以可溶性形式存在,表达量约占总蛋白的40%,应用GST琼脂糖凝胶FF纯化可得到纯度较高的表达产物。

分类号： S852.61

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