文献类型： 中文期刊
第一作者： 刘佳晨
作者： 刘佳晨;郭子强;陈金霞;曹云雷;童武;乔思娜;刘长龙;赵冉;郑海红;童光志;李丽薇;高飞
作者机构：
关键词： 非洲猪瘟病毒;CP312R基因;原核表达;多克隆抗体
期刊名称： 中国兽医学报
ISSN：
年卷期： 2024 年 001 期
页码： 1-6
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 为制备ASFV CP312R基因编码蛋白的多克隆抗体，利用PCR方法从非洲猪瘟病毒（African swine fever virus, ASFV）的灭活样品中扩增出924 bp的CP312R基因全长序列，利用同源重组法构建出原核表达质粒pCold-Ⅰ-ASFV-CP312R,将其转化至原核表达感受态细胞BL21中，经1 mmol/L的IPTG低温条件下诱导表达CP312R编码蛋白并经过镍柱亲和层析纯化后，利用SDS-PAGE对重组蛋白进行表达鉴定和反应原性分析，表达蛋白的相对分子质量约为34 kDa,通过Western blot分析，该蛋白能被ASFV抗体特异性识别。将所得的蛋白经处理纯化后免疫小鼠3次，得到含多克隆抗体的血清。利用该抗体检测实验室构建并拯救的表达ASFV CP312R基因编码蛋白的重组猪繁殖与呼吸综合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV）,结果显示该多抗具有良好的反应原性和特异性，并且证明了ASFV CP312R基因编码蛋白可在PRRSV活载体中稳定表达。
分类号： S852.65
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