胡麻专化型尖孢镰刀菌ISSR-PCR最佳反应体系的建立

文献类型: 中文期刊

第一作者: 苑琳

作者: 苑琳;刘姗姗;路福平;李子钦;张辉

作者机构:

关键词: 尖孢镰刀菌;ISSR;正交设计;反应体系;优化;引物筛选

期刊名称: 生物技术通报

ISSN: 1002-5464

年卷期: 2011 年 0 卷 07 期

页码: 205-209

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 采用正交试验设计原理,对尖孢镰刀菌ISSR-PCR反应体系中的5种主要因素进行优化筛选,确立了适合尖孢镰刀菌ISSR分析的反应体系,即25μL PCR反应体积中含有20 ng模板DNA、1 UTaq酶、0.4μmol/L引物、0.2 mmol/LdNTPs、4.0 mmol/L Mg2+和2.5μL10×buffer。PCR反应最佳退火温度根据引物而定,在此基础上筛选出12条扩增稳定、多态性丰富的ISSR引物。此研究为今后利用ISSR技术分析尖孢镰刀菌遗传多样性和群体结构奠定了基础。

分类号: S432.44

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