牛病毒性腹泻病毒Core蛋白的原核表达及多克隆抗体制备

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张康

作者： 张康;张璇;闫遵祥;王磊;张凯;张景艳;罗永江;仇正英;薛欢;李建喜

作者机构：

关键词： 牛病毒性腹泻病毒;Core蛋白;表达;多克隆抗体

期刊名称： 浙江农业学报

ISSN： 1004-1524

年卷期： 2019 年 31 卷 011 期

页码： 1819-1824

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为制备牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的Core蛋白及其多克隆抗体,根据Core蛋白的编码基因序列,设计合成一对特异性引物,利用RT-PCR扩增BVDV Core基因并定向插入Pet30a载体中,构建重组质粒Pet30a-Core,经酶切鉴定后转化大肠埃希菌TOP 10感受态细胞,筛选获得阳性重组菌,以IPTG进行诱导后成功表达出分子质量为20 ku的重组Core蛋白.将诱导表达的蛋白产物经融合蛋白的Ni柱亲和法进行纯化,利用纯化的重组蛋白免疫新西兰白兔制备多克隆抗体,并利用间接ELISA法测出多克隆抗体效价达到1:512000.蛋白质印迹法(Western blot)和间接免疫荧光试验(IFA)证实,多克隆抗体可与细胞中的BVDV抗原发生反应,具有良好的免疫原性和特异性.本实验成功制备了BVDV重组Core蛋白的兔源多克隆抗体,为BVDV的检测及其Core蛋白功能研究奠定了基础.

分类号： S858.23

  • 相关文献

[1]牛病毒性腹泻病毒E1蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备. 康彪,高闪电,独军政,田占成,殷宏,胡永浩. 2018

[2]牛病毒性腹泻病毒重组E2蛋白多克隆抗体的制备及鉴定. 高欲燃,朱远茂,史鸿飞,任宪刚,冯军科,于作,薛飞. 2010

[3]牛病毒性腹泻病毒E1蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备. 康彪,高闪电,独军政,田占成,殷宏,胡永浩. 2018

[4]牛病毒性腹泻病毒E0蛋白的表达与多克隆抗体制备. 王雪枝,朱远茂,史鸿飞,严昊,蔡红,王姝,马磊,薛飞. 2014

[5]牛病毒性腹泻病毒E0蛋白的表达与多克隆抗体制备. 王雪枝,朱远茂,史鸿飞,严昊,蔡红,王姝,马磊,薛飞. 2014

[6]牛病毒性腹泻病毒E2蛋白的多克隆抗体制备及鉴定. 高欲燃,朱远茂,康健,史鸿飞,李娇,任宪刚,冯军科,于作,薛飞. 2011

[7]牛病毒性腹泻病毒玛纳斯株E2基因的克隆及其主要抗原表位区的分段表达. 黄新,王新华,钟发刚. 2009

[8]人分化抑制因子Id-3基因在大肠埃希氏菌中的高效表达及其多克隆抗体的制备. 林燕,童铁钢,穆丹梅,白宇,杨木蕾,郑敏,吴东来. 2008

[9]鸽子瘦素基因成熟肽重组蛋白的表达及多克隆抗体的制备. 雷明明,邵西兵,施振旦. 2017

[10]莫氏巴贝斯虫滑动体组件蛋白基因gap45、gap50、myo A和mlc的克隆表达与多克隆抗体制备. 王锦明,刘爱红,任巧云,马米玲,刘志杰,李安岩,李有全,赵帅阳,张浩浩,殷宏,罗建勋,关贵全. 2013

[11]日本脑炎病毒NS3基因C端的表达与多克隆抗体研制. 邓绪芳,史子学,邱亚峰,沈阳,邵东华,马志永. 2010

[12]人分化抑制因子Id-3基因在大肠埃希菌中的高效表达及其多克隆抗体的制备. 林燕,童铁钢,穆丹梅,白宇,杨木蕾,郑敏,吴东来. 2008

[13]莫氏巴贝斯虫actin,aldolase和trap基因的克隆表达与多克隆抗体的制备. 王锦明,杨吉飞,李安岩,刘爱红,任巧云,马米玲,刘志杰,李有全,赵帅阳,张浩浩,殷宏,罗建勋,关贵全. 2013

[14]环形泰勒虫TaSDP基因的原核表达及TaSDP蛋白多克隆抗体的制备. 杨聪山,刘军龙,李有全,田占成,赵洪喜,刘娟,刘爱红,任巧云,牛庆丽,杨吉飞,谢俊仁,罗金,陈泽,张林,刘志杰,刘光远,殷宏,关贵全,罗建勋. 2015

[15]莫氏巴贝斯虫actin;aldolase和trap基因的克隆表达与多克隆抗体的制备. 王锦明,杨吉飞,李安岩,刘爱红,任巧云,马米玲,刘志杰,李有全,赵帅阳,张浩浩,殷宏,罗建勋,关贵全. 2013

[16]犬瘟热病毒A株核衣壳蛋白基因的克隆、表达及特性分析. 周洁,李昌文,张洪英,陈洪岩,李建伟,曲连东. 2006

[17]鸡贫血病毒衣壳蛋白的表达纯化及多克隆抗体制备. 王晓艳,文刚,高玉龙,高宏雷,王笑梅. 2006

[18]禽白血病劳斯肉瘤病毒衣壳蛋白P27基因的克隆、原核表达及多克隆抗体的制备. 乔彩霞,关云涛,陈洪岩,刘怀然,蔡雪辉,李昌文,葛俊伟,刘家森. 2004

[19]莫氏巴贝斯虫滑动体组件蛋白基因gap45、gap50、myoA和mlc的克隆表达与多克隆抗体制备. 王锦明,刘爱红,任巧云,马米玲,刘志杰,李安岩,李有全,赵帅阳,张浩浩,殷宏,罗建勋,关贵全. 2013

[20]鸡白介素18成熟肽基因原核表达及抗血清的制备. 张海玲,冉多良,刘培欣,闫丽辉,曹殿军. 2006

作者其他论文 更多>>

微信小程序