牛病毒性腹泻病毒两种基因型双重RT-PCR检测方法的建立及应用
文献类型: 中文期刊
第一作者: 王勤
作者: 王勤;何博;欧云文;刘俐君;杨磊;潘琴;张杰
作者机构:
关键词: 牛病毒性腹泻病毒1型;牛病毒性腹泻病毒2型;双重反转录-聚合酶链反应
期刊名称: 动物医学进展
ISSN:
年卷期: 2021 年 009 期
页码: 24-29
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 为建立牛病毒性腹泻病毒(BVDV)双重RT-PCR检测方法,根据BVDV-1(AF091605.1、KF501393.1、MK204904.1、MN513404.1和MG923683.1)和BVDV-2(AF502399.1、MG436782.1、 AF145969.1、KC176777.1和MN513411.1)流行毒株5′-UTR保守序列设计2对特异性引物,通过优化反应条件,建立可同时检测BVDV-1和BVDV-2的双重RT-PCR方法。结果显示,该检测方法重复性好、特异性强,可分别检测出BVDV-1和BVDV-2核酸,与牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)、牛轮状病毒(BRV)、牛冠状病毒(BCV)、牛副流感病毒3型(BPIV-3)、猪瘟病毒(CSFV)均不发生交叉反应;最低检测量为1×103拷贝/μL和1×102拷贝/μL;对达州及周边地区的332份临床样品进行检测,结果表明,该地区BVDV-1阳性率为7.83%,BVDV-2阳性率为0.90%,未检出BVDV-1和BVDV-2混合感染的临床样品。综上所述,建立的双重RT-PCR检测方法具有良好的特异性、敏感性、重复性和临床适用性,可用于BVDV的临床诊断和分子流行病学调查。
分类号: S852.653
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