水貂犬瘟热病毒微滴数字PCR检测方法的建立与应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 闫曼平

作者： 闫曼平;商金源;叶京飞;罗国良;王振军;易立;冯二凯;王春霞;赵宗正;陈明军;魏先力;高华;单晓枫;程悦宁

作者机构： 中国农业科学院特产研究所农业农村部经济动物疫病重点实验室;吉林农业大学动物科学技术学院;军事科学院军事兽医研究所;吉林省榆树市秀水镇畜牧站;通辽市科尔沁区动物疫病预防控制中心

关键词： 水貂犬瘟热病毒;微滴数字PCR;N基因

期刊名称： 中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 2023 年 43 卷 012 期

页码： 2445-2450

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为建立检测水貂犬瘟热病毒(mink canine distemper virus,CDV)的微滴数字 PCR(droplet digital PCR,ddPCR)定量方法,以便提供水貂CDV在诊断检测方面的技术支持,本研究根据实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qPCR)检测方法原理,建立了水貂CDV数字PCR方法,并优化了反应条件,评估了特异性、敏感性以及重复性.结果表明:ddPCR方法检测CDV的最适引物浓度为900 nmol/L,探针浓度为250 nmol/L,退火温度为55℃,升降温度为2.5℃/s,最低检测下限为4.4拷贝/μL;除CDV特异性扩增,其他常见病毒特异性检测结果均为阴性;重复性试验的变异系数均小于5%.采用该微滴数字PCR和荧光定量RT-PCR方法对30份犬、貂、狐、貉等组织(其中CDV阳性样品7份)样品进行检测,检测结果与临床检测结果相符.本研究建立的微滴数字PCR方法对CDV定量检测特异性强、灵敏度高,重复性好,可以用于水貂CDV临床样品的核酸检测,对水貂CDV发病早期的诊断提供新的定量检测方法.

分类号： S852.65

  • 相关文献

[1]马铃薯M病毒微滴数字PCR检测方法的建立. 刘晗,黄洁芳,向均,燕照玲,张永江. 2018

[2]利用微滴数字PCR技术分析转基因大豆‘GE-J12’中外源基因的拷贝数. 赵新,刘双,刘娜,李瑞环,曹英芳,兰青阔,王永. 2022

[3]伪狂犬病病毒野毒株与gE基因缺失疫苗株微滴数字PCR鉴别方法的建立. 兰德松,魏澍,顾贵波,侯振中. 2018

[4]应用微滴数字PCR同时检测瓜类种子携带果斑病菌和角斑病菌. 赵子婧,芦钰,田文,王玉玺,温常龙,李健强,徐秀兰,罗来鑫. 2021

[5]转基因玉米T25数字PCR方法的建立与验证. 李夏莹,武玉花,李俊,肖晓琳,张飞燕,梁晋刚,王顥潜,张旭冬,张秀杰. 2020

[6]HSA转基因水稻二重微滴数字PCR定量检测方法研究. 李晓飞,姚晓青,闫晓红,李俊,朱莉,吴刚,罗军玲. 2022

[7]不同施肥处理农田土壤中噬菌体与细菌携带抗生素抗性基因的比较. 胡雪莹,张越,郭雅杰,仇天雷,高敏,孙兴滨,王旭明. 2022

[8]貂肠炎病毒微滴数字PCR检测方法的建立与应用. 商金源,叶京飞,罗国良,王振军,冯二凯,王春霞,贾北宁,李斌茹,赵宗正,陈明军,魏先力,程悦宁. 2023

[9]狂犬病毒CVS株G基因和N基因共表达重组腺病毒载体的构建. 李江涛,殷相平,张金卫,丁农,柳纪省. 2011

[10]鸡传染性支气管炎病毒XJ株N基因的克隆表达及抗原性初步鉴定. 齐晓亮,夏俊,成进,陆桂丽,沙依兰古丽,汪萍. 2010

[11]猪流行性腹泻病毒N基因的原核表达与鉴定. 刘华南,曹伟军,杨帆,张艳,杨华,王松豪,郑海学. 2013

[12]猪传染性胃肠炎病毒LY86株N基因序列分析及病毒在猪睾丸细胞上的增殖特性研究. 杨元奇,季艳杰,张金秋,苗晋锋. 2017

[13]小反刍兽疫病毒N蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备. 周岩岩,李玲霞,吴锦艳,余树芳,李娇阳,刘丹,冯倩,孙晶晶,何苗,魏凡华,尚佑军. 2019

[14]变异猪流行性腹泻病毒M和N双基因融合真核表达及其活性鉴定. 王隆柏,陈秋勇,吴学敏,陈如敬,车勇良,周伦江. 2020

[15]猫传染性腹膜炎病毒AH1905株N基因的生物信息学分析及原核表达. 王元红,邢雪,李传峰,朱杰,王勇,刘光清. 2020

[16]猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)福建分离株核衣壳蛋白基因(N)的克隆与表达分析. 王劭,朱小丽,朱晓琳,陈少莺,林锋强,陈仕龙,程晓霞,李兆龙,江斌. 2013

[17]鸡传染性支气管炎病毒S1,M和N基因遗传变异相关性. 亓丽红,艾武,黄兵,王莉莉,秦卓明,宋敏训. 2010

[18]犬瘟热病毒Lederle株H,N全基因序列分析及表达研究. 杨应丽,杨兵,赖平安,王金洛,徐福洲. 2007

[19]猪流行性腹泻病毒P55野生毒株主要结构蛋白遗传分析. 高杏丹,陈曦,杨金先,俞伏松,李英英,林天龙,宋铁英. 2013

[20]鸡传染性支气管炎病毒山东株的遗传变异分析. 袁小远,金维江,徐怀英,张玉霞,秦卓明. 2009

作者其他论文 更多>>

微信小程序