空肠弯曲菌环介导等温扩增检测方法的建立和优化
文献类型: 中文期刊
第一作者: 许紫建
作者: 许紫建;杨兵;苏霞;周宏专;史爱华;徐福洲
作者机构:
关键词: 空肠弯曲菌;环介导等温扩增方法;检测;优化
期刊名称: 华北农学报
ISSN: 1000-7091
年卷期: 2013 年 28 卷 03 期
页码: 222-226
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 首先根据空肠弯曲菌mapA基因序列设计LAMP引物,建立检测空肠弯曲菌的LAMP检测方法。继而对LAMP方法中不同反应组分的浓度分别进行筛选,结果显示,当内外引物浓度分别为1.6,0.2μmol/L、Mg2+浓度为8mmol/L、dNTP浓度为1.4 mmol/L、Betaine浓度为0.8 mol/L时获得最佳的反应结果。最后对LAMP反应的特异性和敏感性进行检测,特异性检测结果显示,对其他13种革兰氏阴性和革兰氏阳性细菌扩增结果均为阴性;敏感性检测结果显示,对空肠弯曲菌基因组DNA的检测限为每个反应管100 fg,对空肠弯曲菌培养菌液检测限为每个反应管7.5cfu。试验建立的LAMP方法为快速简便地自动物源性产品中检测空肠弯曲菌奠定了基础。
分类号: S855.1
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