抗Ⅰ型马立克氏病毒sorf2蛋白的多克隆抗体制备及其特异性鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 崔宁

作者： 崔宁;苏帅;李久庆;赵鹏;李延鹏;丁家波;崔治中

作者机构：

关键词： Ⅰ型马立克氏病毒;sorf2基因;多克隆抗体;Westernblot;间接免疫荧光

期刊名称： 微生物学报

ISSN： 0001-6209

年卷期： 2013 年 53 卷 03 期

页码： 284-292

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】制备高效价鼠和兔抗Ⅰ型马立克氏病毒(Marek's disease virus,MDV)sorf2蛋白的多克隆抗体并对其特异性进行鉴定。【方法】以Ⅰ型MDV GX0101为模板,利用PCR扩增sorf2基因,分别克隆进原核表达载体pET-28a(+)和pET-32a(+)中,转化大肠杆菌BL21(Rosetta),经异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导后进行融合蛋白的表达和纯化。用纯化的融合目的蛋白常规免疫6-8周龄Balb/c小鼠和成年新西兰大白兔,制备抗sorf2蛋白的多克隆抗体。用Western blot和间接免疫荧光试验鉴定多克隆抗体的特异性。【结果】Ⅰ型MDV的sorf2基因在原核表达载体中能够正确表达,免疫小鼠和兔后能获得与sorf2蛋白发生特异性反应的高效价的多克隆抗体。【结论】制备的抗sorf2蛋白的多克隆抗体能够特异的鉴定MDV sorf2基因缺失株,有效的区分MDV疫苗株HVT(FC-126)与Ⅰ型MDV毒株,用于临床MDV野毒的分离鉴定。

分类号： R392.1

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