铜绿假单胞菌外毒素A基因的克隆与原核表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 吴建勇

作者： 吴建勇;王登峰;杨学云;李建军;王治才

作者机构：

关键词： 铜绿假单胞菌;外毒素A;克隆;表达

期刊名称： 草食家畜

ISSN： 1003-6377

年卷期： 2013 年 02 期

页码： 64-68

摘要： 为建立铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)外毒素A(Exotoxin A,ETA)的原核表达方法,采用PCR技术扩eta基因,将其插入pET-28a载体构建重组质粒pET-28a-eta,并对重组质粒进行双酶切、PCR及测序鉴定。转入BL21(DE3)中诱导表达,检测目的蛋白大小及反应原性,然后进行表达条件的优化及其表达形式检测。结果表明,所扩增eta基因大小为1917 bp,与GeneBank参比序列一致性在98.70%;蛋白分析表明,rETA大小为74 KDa,具有和天然毒素相似的反应原性。目的基因在37℃、0.6 mmol/LIPTG诱导3 h获得最佳表达。该蛋白在超声波裂解上清和包涵体中均有分布,但主要以包涵体为主。该研究为进一步开展ETA的批量纯化提供了前提条件。

分类号： S852.61

  • 相关文献

[1]甘蔗核苷二磷酸激酶(NDPK1)基因克隆及表达分析. 李杨瑞,杨丽涛. 2012

[2]粘质沙雷氏菌脂肪酶基因的克隆表达和酶学性质的研究. 陈英,张搏,黄日波. 2010

[3]短小芽孢杆菌HZbp脂肪酶基因的克隆表达. 朱绮霞. 2010

[4]鼠李糖乳杆菌D-(+)-乳酸脱氢酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达. 黄靖华,卢福芝,孙靓,彭立新. 2010

[5]丙酮丁醇梭菌ldhL基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达. 杨登峰,郭媛,马潘蕾,韦宇托,黄日波. 2010

[6]猪PILRA基因克隆及变异剪接体鉴定. 李利族,韩丽鑫,王金奎,汪亮,刘娣,杨秀芹. 2015

[7]牛GDF-9基因的克隆与组织表达的分析. 田蕾,刘永斌,王峰,田春英,刘美霞,达赖,祁云霞,董文杰,荣威恒,孙洪深. 2007

[8]‘藤稔’葡萄VvGAI基因的克隆、亚细胞定位及时空表达分析. 杨光,曹雪,房经贵,宋长年,王晨. 2011

[9]伪狂犬病病毒Ea株ORF-1基因在BHK-21细胞上的表达. 徐引弟,陈焕春,肖少波. 2009

[10]湖北海棠植物络合素合酶MhPCS基因克隆及表达分析. 姜倩倩,孙晓莉,曹慧,邹岩梅,束怀瑞. 2013

[11]低温胁迫下龙眼碳酸酐酶基因(CA)的克隆与表达分析. 何新华,罗聪,杨丽涛,黄杏,胡颖. 2012

[12]甘蓝型油菜湿害相关基因BnLDH-1的克隆和表达分析. 吴金海,周玉堂,谢伶俐,张学昆,许本波. 2016

[13]少孢节丛孢菌胞外丝氨酸蛋白酶P186基因的克隆、序列分析及表达. 赵海龙,孟庆玲,乔军,陈双庆,王国超,谢堃,胡政香. 2014

[14]鸡贫血病毒VP2基因的克隆、序列分析及表达. 杨雨辉,陈奖励. 2000

[15]奶牛乳腺炎源性金黄色葡萄球菌山东分离株β-溶血素基因的克隆及原核表达. 杨钦,王长法,杨宏军,杨少华,高运东,仲跻峰,彭广能. 2009

[16]口蹄疫病毒非结构蛋白3AB、3A基因的克隆与原核表达. 张先锋,易忠,魏玉荣,胡尔玛西,符子华. 2010

[17]荔枝果实内切-1,4-β-葡聚糖酶基因(EG)的克隆及其表达分析. 吴富旺,邝健飞,陆旺金,刘洪见,陈建业. 2009

[18]莱姆病螺旋体鞭毛平截性蛋白的表达及其诊断潜力研究. 仝彩玲,吴银娟,周勇志,曹杰,李培英,周金林. 2011

[19]中华鲟piwil1基因的克隆表达特征研究. 李创举,杨晓鸽,岳华梅,叶欢,危起伟. 2016

[20]枣树肌动蛋白基因cDNA片段的克隆及其表达分析. 孟玉平,张洁,张春芬,孙海峰,曹秋芬. 2009

作者其他论文 更多>>

微信小程序