猪Hokovirus LAMP检测方法的建立及应用

文献类型: 中文期刊

第一作者: 李彬

作者: 李彬;杜露平;何孔旺;孙冰;倪艳秀;温立斌;张雪寒

作者机构:

关键词: 猪Hokovirus;环介导等温扩增(LAMP);检测方法

期刊名称: 西南农业学报

ISSN: 1001-4829

年卷期: 2014 年 27 卷 02 期

页码: 859-863

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为提高猪Hokovirus(PHoV)检测的敏感性和简便性,本研究采用环介导等温扩增(LAMP)技术,建立了一种敏感、特异、快速、简便、实用的检测PHoV的技术。针对PHoV VP1/2基因保守区设计4条引物,进行LAMP扩增,对扩增反应进行优化并检测其敏感性和特异性。结果表明,所建立的方法最佳反应时间为60 min,反应温度为65℃,该方法具有良好的特异性,与其它常见动物病毒(PRRSV、PCV2、CSFV、PRV、PPV、JEV)无交叉反应,对PHoV的最低检出量为10拷贝,其敏感性是PCR方法的10倍,且通过加入荧光染料可直接判定结果。研究表明,该方法特异性强、敏感性高,且操作简便、检测成本低、检测时间短,不需要特殊的仪器,本研究建立的LAMP方法可以作为PHoV在临床上的一种检测技术。

分类号: S828

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