快速检测大肠杆菌O157的LAMP方法的建立与评价
文献类型: 中文期刊
第一作者: 张雪寒
作者: 张雪寒;何孔旺;叶青;倪艳秀;温立斌;李彬;王小敏;周俊明;郭容利
作者机构:
关键词: 环介导恒温扩增技术;rfbE基因;快速检测
期刊名称: 中国兽医学报
ISSN: 1005-4545
年卷期: 2013 年 33 卷 07 期
页码: 1027-1031
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 利用DNA环介导恒温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP),以rfbE基因为靶序列,设计LAMP引物,建立LAMP反应体系与条件,进行灵敏度和特异性试验。结果显示,整个检测过程仅需1h即可通过肉眼直接目测试验结果。在灵敏度试验中,rfbE-LAMP对O157菌液和模拟阳性样品的最低检测限分别为1CFU/mL和1CFU/g。在特异性试验中,以其他血清型大肠杆菌以及沙门杆菌基因组DNA为模板对rfbE基因进行检测,均没有发生非特异性扩增反应。试验建立的LAMP检测方法具有操作简单安全、检测灵敏度高、特异性高的特点,能够满足基层实验室、应急检测或现场监测等方面的使用需求。
分类号: S852.61
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