黄瓜枯萎病抗病性鉴定方法研究──胚根接种法

文献类型: 中文期刊

第一作者: 翁祖信

作者: 翁祖信;蒋兴祥;肖小文

作者机构:

期刊名称: 中国蔬菜

ISSN: 1000-6364

年卷期: 1985 年 1 卷 02 期

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摘要: 前言 黄瓜枯萎病(Fusarium xysporum(S-chl) f.sp.cucumerinum Owen)是由土壤传播,病菌由根部侵入的一种导管性病害。几轮作倒茬困难,以及温室、塑料大棚连年种植的地块,病害均较重,一旦发病,就难于防治。进行抗病品种的选育,是防治黄瓜枯萎病经济有效的途径之一,近年来,国内外都在积极开展这方面的工作,而抗病性鉴定方法,却是抗病育种的重要环节。制定出准确、简便、快速的鉴定方法,可以加速抗病育种的选育过程。过去鉴定黄瓜枯萎病抗病性,主要采用菌土、灌根、浸根接种及人工病圃和田间自然发病鉴定方法,但都存在用菌量大,鉴定周期长,操作不够简便等问题。从1980年起。我们试验用胚根法,进行不同浓度、不同时间以及不同胚根长度和不同播种基质接种试验,获得了准确、简便、快速的鉴定效果,现简报如下。 方法 一、鉴定材料准备:将所需测试的黄瓜种子用0. 1%升汞液消毒IO分钟,用清水冲洗干净,置28℃恒温箱内催芽,待胚根长至1厘米时待用。 播种基质采用煌石或任石与土混合物(1:4),经高压消毒灭菌后,装入小塑料钵内.每钵播种2粒。 二、接种体制备:将纯化的PDA平板培养基上的枯萎病菌,切成0.2厘米见方的菌块,移植于盛有镰刀菌培养液的三角瓶中,每瓶2~4块,置28℃摇床上振荡培养5天,取培养好的菌液用双层纱布过滤,除去菌丝,将滤液经5000rPm离心10分钟,取其沉淀物,加蒸馏水稀释成所需浓度供接种。 H、接种过程:将催芽后胚根长约1厘米的种子,按所需浸渍时间浸入制备好的菌液中,然后倾出菌液,将种子播于塑料钵内。接种鉴定在定温室内进行。其温度为20~25 t。 四、病使调查及分级: (1)病情分级: 0级:无病症I 1级。胚轴及子叶症状轻微,子叶失去光泽; 2级:植株轻度萎蔫,胚轴出现坏死斑,或一片子叶黄化。 3级:植株中度萎蔫,子叶下垂或僵化; 4级:植株严重萎蔫,倒伏枯死或不出苗(烂种)。 (2)调查: 接种后一周开始进行调查,约15~20天完毕。 。。-$。。。=3Hanfferx100s@①①_z(病级株数X病级数)”’”’”‘”一调查总株数。最高病级致。。vv 以病情指数作为评定品种抗病程度的依据,病株率供作参考。 试验结果及分析 一、不同接种浓度和接种时间与发病关系 1981年采用感病品种津研2号和中抗品种长春密刺,无锡早测试,浓度试验设1.1x 10’/ml和2.2 x 10’/ml,接种 1/J’时I不同接种时间设1.lx 10’/ml接种10、 20、 40分钟,结果如表1、 2。 1983年设10’/ml和2 x 10‘/ml接种0.5、 1和2/J’时,结果如表8。 由以上结果看出,其测试品种的发病早晚及病情严重度,与接种浓度和接种时间长短(接种压)’成正相关。胚根接种,多数在子叶期,少数在第一真叶期开始发病,其发病和死苗高峰期一般在播种后5~15天内出现。品种间病情差异在发病初期表现明显,感病品种发病早、死苗快。同时发病差异也受接种压影响。接种压低,品种间发病差异大,接种压大,发病均较重,品种间差异缩小。不同品种抗性测定结果如表4。 二、不同胚根长度接种与发病关系 为了寻找接种敏感期,经不同胚根长度明确,不同生长时期接种,其病情发展有所不同。结果以1厘米长度接种,病情最重,随胚根长度大于或小于1厘米,病情随之减轻,因此认为,1厘米左右为接种敏感期,如表5。5、不同按种方法对比试验为了验证胚根接种方法的准确性,与菌土法和灌根接种法进行对比试验,其结果如表6。 对上述试验数据转换成反正弦值并进行方差分析得表7。 由表7可见,不同黄瓜品种间,抗病性差异达到显著水平。不同接种方法之间,差异不显著,其三种接种方法所得结果基本一致,说明采用胚根接种法是可行的。 四、应用本刹定法进行品种抗清性终定举例。 1981年起,本所黄瓜育种组和品资室黄瓜组,采用胚根接种法测定枯萎病抗性,共计有1500多份材料(包括品种和品系),基本能准确反映不同品种间的抗性差异,见表8、9。 小结 1.胚根接种法,是目前国内测定黄瓜枯萎病苗期抗病性的一种新方法。由于它用菌量少,接种手续简便,鉴定周期短(15~20天),准确性较高,适用于大批量抗病育种原始材料的筛选,可达到准确、简便、快速的效果。从1983年起,已被“全国黄瓜抗病育种攻关协作组”采用。 2.接种压:菌液抱子浓度 10’/ml~10’/ml,浸种0.5/J’时,保持温度20~25t。接种压过低,发病太轻,不利于筛选;压力过大,发病重,品种间差异缩小。因此应根据鉴定品种和目的要求掌握适度的接种压。 3.接种敏感期,为胚根长约1厘米左右,过长或过短病情都随之减弱。品种测定时,要求胚根长度一致,否则将影响鉴定结果的准确性。 4.抗病性测定调查时间,一般在15天之内。播后9天品种间抗性相差6倍。14天相差2.5倍,16天相差1倍。品种抗病性差异在发病初期表现明显,基本上可反映出抗病性特性。感病品种发病早、死苗快,抗病品种发病晚,死苗慢。调查可在对照感病品种发病盛期和死苗高峰期进行二次。 据苗期和病固成株期抗病性测定调查看出,黄瓜同一品种只因产地来源或株系不同其抗病性有很大的差异。因此在可能条件下,抗病性测定应以株系为单位。另外一般春性品种较秋性品种抗病,认为从春性品种中选育出抗病品种的机会多。 5.播种基质以任石为佳。焊石重量轻,消毒操作较为省力,可多次重复使用。如鉴定后需要将抗病单株保留继续种植采种者,应采用任石与土混合(1:4),这种基质,便于鉴定后移苗定植。 6.枯萎病菌的致病力,可随菌种存放时间的延长而减弱。鉴定接种前,应进行提纯复壮,测定其致病力,从而适当调整接种压。同一批黄瓜品种进行重复接种鉴定时,每次所用菌种的来源应一致,以免影响鉴定效果。黄瓜枯萎病抗病性鉴定方法研究──胚根接种法@翁祖信$中国农科院蔬菜研究所 @蒋兴祥$中国农科院蔬菜研究所 @肖小文$中国农科院蔬菜研究所

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