柱花草单粒种子DNA提取和RAPD扩增

文献类型: 中文期刊

第一作者: 傅小霞

作者: 傅小霞;漆智平;何华玄

作者机构:

关键词: 柱花草;种子;DNA提取;RAPD

期刊名称: 热带农业科学

ISSN: 1009-2196

年卷期: 2004 年 24 卷 03 期

页码: 28-30

摘要: 以7个柱花草品种的单粒种子为材料,采用改良的CTAB法提取DNA,进行RAPD扩增。结果表明,采用单粒种子提取的DNA完整性好。采用模板3μL,随机引物2μL(10μmol/L),dNTPs2.5μL(2mmol/L),Taq酶0.2μL(5U/μL),MgCl2溶液2μL(25mmol/L),10×Buffer2.5μL(500mmol/LKCl,100mmol/LTris-Cl,pH9.0,25℃,10mL/LTritonX-100),无菌水12.8μL,总体积为25μL的反应体系,可扩增出谱带清晰的RAPD产物。扩增程序为:94℃预变性4min;94℃变性30s、37℃复性30s、72℃延伸90s,共40个循环;72℃延伸6min。

分类号: S54

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