猪IFN-γ mRNA TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 韦天超

作者： 韦天超;田志军;周艳君;安同庆;肖燕;彭金美;姜一峰;童光志

作者机构：

关键词： 猪;IFN-γ;荧光定量RT-PCR;TaqMan荧光探针

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2009 年 39 卷 2 期

页码： 168-172

收录情况： CSCD

摘要： 为建立一种检测猪γ-干扰素(IFN-γ)的荧光定量RT-PCR方法,针对猪IFN-γ基因和管家基因cyclophilin A(CyPA)的核苷酸序列分别设计了特异性引物和TaqMan荧光探针,以重组质粒pMD18-T-IFN-γ和pMD18-T-CyPA为标准品,进行实时荧光定量RT-PCR检测,并构建猪IFN一γ mRNA和CyPA的荧光定量RT-PCR标准曲线.结果表明,建立的方法在1×10~1～1×10~7copies/μL模板范围内具有良好的线性关系,相关系数r2均高达0.999,扩增效率均高于99.0%;可检测至少为100 copies的阳性标准品.该方法具有快速、敏感性高、特异性强和重复性好等特点,可应用于临床样品的检测.

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