棉铃虫不同品系Gqα基因的比较及其原核表达与纯化

文献类型: 中文期刊

第一作者: 苏宏华

作者: 王桂荣;吴孔明;张永军;梁革梅;郭予元

作者机构:

关键词: Gqα;内含子;棉铃虫;抗性;原核表达

期刊名称: 植物保护

ISSN: 0529-1542

年卷期: 2010 年 36 卷 06 期

页码: 16-20

收录情况: 北大核心

摘要: 为了阐明Gqα的DNA序列情况,分别以cDNA和总DNA为模板,对Gqα进行PCR扩增,结果发现,Gqα在DNA水平上没有内含子。为了了解不同棉铃虫品系Gqα的变异情况,以实验室5个棉铃虫品系的中肠总DNA为模板,使用Pyrobest高保真酶对该基因进行扩增,测序后翻译成氨基酸序列发现,田间的耐药性品系只有2个氨基酸的变异,即:第163位的非极性A(丙氨酸)变成了极性T(苏氨酸);第353位的非极性V(缬氨酸)变成了碱性R(精氨酸);实验室内毒蛋白品系只有一个氨基酸的变异,第353位的V变成了R;其他2种实验室品系没有任何氨基酸的变异。个别氨基酸的变异可能与棉铃虫对Bt毒素产生抗性相关。将Gqα编码区克隆到表达载体pET21b中,表达出带有6个组氨酸标签的重组蛋白并对其进行了纯化,为进一步研究其功能奠定了基础。

分类号: S433

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