油菜黑胫病菌ISSR-PCR反应体系优化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 郝丽芬

作者： 郝丽芬;宋培玲;李子钦;李欣洲;张键;包玉英

作者机构：

关键词： 油菜黑胫病原菌;ISSR-PCR;体系优化

期刊名称： 华北农学报

ISSN： 1000-7091

年卷期： 2013 年 28 卷 04 期

页码： 204-207

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 通过正交试验设计,对油菜黑胫病菌ISSR-PCR反应体系的各影响因素进行研究,即从Taq酶、Mg2+、dNTPs、引物以及模板浓度5因素4水平进行优化,筛选并建立了适合油菜黑胫病菌ISSR分子标记的最佳反应体系,即在25μL反应体系中包含Taq DNA酶1 U,Mg2+2.0 mmol/L,dNTPs 0.2 mmol/L,引物0.6μmol/L,模板40 ng以及2.5μL 10×Buffer。并以扩增条带丰富、清晰、稳定性强为原则,从所查找的110条引物中筛选出24条适于油菜黑胫病菌ISSR-PCR扩增的引物,同时对各引物的最佳退火温度进行了筛选确定,经对20株病原菌的稳定性检测,证实该优化体系可用于研究该病原菌的遗传多样性。

分类号： S435.654

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