半滑舌鳎vstm2a基因的响应细菌感染的表达模式和功能
文献类型: 中文期刊
第一作者: 林梦娇
作者: 林梦娇;陈亚东;刘洋;王磊;张天时;史萌;陈松林
作者机构:
关键词: 半滑舌鳎;免疫;vstm2a;跨膜蛋白;细菌结合
期刊名称: 上海海洋大学学报
ISSN: 1674-5566
年卷期: 2024 年 33 卷 006 期
页码: 1299-1312
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 为了探究半滑舌鳎vstm2a基因响应细菌感染的表达特征和其蛋白功能,采用实时荧光定量(RTqPCR)检测哈维氏弧菌、鳗弧菌、溶藻弧菌、迟缓爱德华氏菌和无乳链球菌感染半滑舌鳎后免疫组织(鳃、肝脏、脾脏、肠道和肾脏)中vstm2a的相对表达特征;构建vstm2a基因原核表达重组质粒,获得重组蛋白,采用牛津杯法、细菌蛋白结合实验和siRNA沉默等,探究vstm2a蛋白在细菌入侵中的功能。结果显示:vstm2a蛋白具有跨膜结构域和Ig结构域,在细胞表面行使功能;相关免疫组织中的vstm2a基因的表达量在哈维氏弧菌、鳗弧菌、溶藻弧菌、迟缓爱德华氏菌和无乳链球菌感染半滑舌鳎后6 h、48 h和72 h显著升高;vstm2a重组蛋白与细菌孵育后,经过低速离心与细菌共同沉淀;抑菌实验显示其显著抑制细菌的生长,并且siRNA降低vstm2a基因后,抑制了细胞因子IL-6和IL-10等基因的表达。证明了vstm2a蛋白响应细菌入侵,可以识别和结合细菌,通过抑制细菌生长和激活促炎症细胞因子,对病原菌的感染起到免疫防御作用,是一种重要的免疫蛋白。本研究有助于解析细菌黏附细胞或鱼体抵抗细菌入侵的机制,为未来采用分子手段选育抗性品种提供一定的理论基础。
分类号: S943
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